柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

吴天利;李菊;张永艳;胡敏伦;闫化学;姜波;谢丹;袁超力;钟广炎;

doi:10.13718/j.cnki.xdzk.2015.07.009

西南大学学报（自然科学版）

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柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

吴天利;李菊;张永艳;胡敏伦;闫化学;姜波;谢丹;袁超力;钟广炎;. 柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2015, 37(7): 59-66. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.07.009

引用本文:

Citation:

柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

吴天利;李菊;张永艳;胡敏伦;闫化学;姜波;谢丹;袁超力;钟广炎;

西南大学园艺园林学院; 广东省农业科学院果树研究所; 四川省农业科学院园艺研究所;

WU Tian-li;LI Ju;ZHANG Yong-yan;HU Min-lun;YAN Hua-xue;JIANG Bo;XIE Dan;YUAN Chao-li;ZHONG Guang-yan;School of Horticulture and Landscape Architecture,Southwest University;Institute of Fruit Tree Research,Guangdong Academy of Agricultural Sciences;Institute of Horticulture Research,Sichuan Academy of Agricultural Sciences;

摘要: 以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥、蓖麻、番茄、毛果杨、大豆、挪威云杉、欧洲桤木、百合等18个物种的同源蛋白具有相同的4个保守区域,属于枯草杆菌蛋白酶.通过构建该基因的超表达载体并以沙田柚为材料进行遗传转化,获得了该基因的9个转基因沙田柚株系.实时定量PCR结果表明,4个用于检测的株系中有3株的表达量明显高于对照.
- 丝氨酸蛋白酶 /
- 枯草杆菌蛋白酶 /
- 基因克隆 /
- 序列分析 /
- 遗传转化

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柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

吴天利;李菊;张永艳;胡敏伦;闫化学;姜波;谢丹;袁超力;钟广炎;

西南大学园艺园林学院; 广东省农业科学院果树研究所; 四川省农业科学院园艺研究所;

关键词:

摘要: 以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥、蓖麻、番茄、毛果杨、大豆、挪威云杉、欧洲桤木、百合等18个物种的同源蛋白具有相同的4个保守区域,属于枯草杆菌蛋白酶.通过构建该基因的超表达载体并以沙田柚为材料进行遗传转化,获得了该基因的9个转基因沙田柚株系.实时定量PCR结果表明,4个用于检测的株系中有3株的表达量明显高于对照.