山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达

彭学强,苏鲁方,蒋曹德

doi:10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.002

西南大学学报（自然科学版）

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山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达

彭学强,苏鲁方,蒋曹德. 山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2015, 37(11): 8-15. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.002

引用本文:

彭学强,苏鲁方,蒋曹德. 山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2015, 37(11): 8-15. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.002

PENG Xue-qiang,SU Lu-fang,JIANG Cao-de. Cloning,Expression and Tissue Distribution of Goat Interleukin-15 Gene[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2015, 37(11): 8-15. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.002

Citation:

PENG Xue-qiang,SU Lu-fang,JIANG Cao-de. Cloning,Expression and Tissue Distribution of Goat Interleukin-15 Gene[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2015, 37(11): 8-15. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2015.11.002

山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达

彭学强,苏鲁方,蒋曹德

西南大学动物科技学院/重庆市草食动物资源保护与利用工程研究中心,重庆400715; 西南大学生命科学学院,重庆400715 ; 西南大学生命科学学院,重庆,400715

Cloning,Expression and Tissue Distribution of Goat Interleukin-15 Gene

PENG Xue-qiang,SU Lu-fang,JIANG Cao-de

摘要: 白细胞介素15（Interleukin‐15，IL‐15）是一个多功能细胞因子，在免疫系统和非免疫系统中都有重要作用，包括刺激T细胞增殖和激活自然杀伤细胞，可引起肌肉萎缩性刺激和肌肉收缩反应．但是，在山羊中该基因的研究尚未见报道．该研究采用RT‐PCR方法克隆了山羊肌肉IL‐15基因，使用荧光定量的方法构建该基因组织表达谱．序列分析表明山羊IL‐15包含486 bp全长编码序列，该序列编码162个氨基酸，可形成4‐α螺旋的空间结构，其核苷酸和氨基酸序列与绵羊（97.55％，94.48％）和牛（95.91％，92.02％）的同源性最高，与鸡的同源性最低（48.59％，27.89％）．荧光定量检测表明该基因在肌肉和脾中相对表达量最高，在大脑中相对表达量最低．进一步通过PCR方法获得缺失长信号肽的成熟肽蛋白基因序列，重组到原核表达载体pET32a（＋）中进行原核表达，获得29 kDa的融合蛋白，并通过Western blot 方法进行了鉴定．这些结果说明IL‐15序列在哺乳动物间是保守的，在山羊中的功能与其他动物相似．成功构建的山羊IL‐15表达系统为进一步研究山羊该基因的功能及应用奠定了基础．
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山羊 IL-15基因克隆、组织表达谱分析与表达

彭学强,苏鲁方,蒋曹德

西南大学动物科技学院/重庆市草食动物资源保护与利用工程研究中心,重庆400715; 西南大学生命科学学院,重庆400715 ; 西南大学生命科学学院,重庆,400715

关键词:

摘要: 白细胞介素15（Interleukin‐15，IL‐15）是一个多功能细胞因子，在免疫系统和非免疫系统中都有重要作用，包括刺激T细胞增殖和激活自然杀伤细胞，可引起肌肉萎缩性刺激和肌肉收缩反应．但是，在山羊中该基因的研究尚未见报道．该研究采用RT‐PCR方法克隆了山羊肌肉IL‐15基因，使用荧光定量的方法构建该基因组织表达谱．序列分析表明山羊IL‐15包含486 bp全长编码序列，该序列编码162个氨基酸，可形成4‐α螺旋的空间结构，其核苷酸和氨基酸序列与绵羊（97.55％，94.48％）和牛（95.91％，92.02％）的同源性最高，与鸡的同源性最低（48.59％，27.89％）．荧光定量检测表明该基因在肌肉和脾中相对表达量最高，在大脑中相对表达量最低．进一步通过PCR方法获得缺失长信号肽的成熟肽蛋白基因序列，重组到原核表达载体pET32a（＋）中进行原核表达，获得29 kDa的融合蛋白，并通过Western blot 方法进行了鉴定．这些结果说明IL‐15序列在哺乳动物间是保守的，在山羊中的功能与其他动物相似．成功构建的山羊IL‐15表达系统为进一步研究山羊该基因的功能及应用奠定了基础．