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叶菜类蔬菜营养丰富，含有多种有机物和人体必需的矿物质及维生素，备受消费者青睐.但叶菜类蔬菜如上海青[1-2]、小白菜[3]、生菜[4]等由于比表面积和气孔大、含水量高，组织柔嫩，生理代谢旺盛，采后贮运过程中极易褪绿黄化、失水萎蔫和霉变腐烂.包装可有效抑制失水，调节气体成分，延缓衰老、延长保鲜期[5]，对生鲜果蔬保持鲜活品质，满足消费保鲜需求至关重要.如聚乙烯(PE)[6-7]、聚丙烯(OPP)已被广泛应用于果蔬或者食品包装行业，聚氯乙烯膜(PVC)[8]、乙烯-乙酸乙烯共聚物(EVA)[9]、BOPP膜[10]、高压低密度聚乙烯(LDPE)、低压高密度聚乙烯(HDPE)[11]、纳米包装材料等[12]也有不同程度的应用.研究显示上述包装材料能较好地抑制果蔬的呼吸强度和水分散失，延缓乙烯释放和次生代谢产物MDA累积，抑制衰老相关酶如多酚氧化酶(PPO)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)等活性和保持相关抗性酶如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)等活性，从而保持生鲜果蔬鲜活品质.
瓢儿菜是一种十字花科芸薹属叶菜，碧绿鲜嫩、叶片肥厚，可炒食、烧汤，色美味鲜，营养丰富，富含维生素和抗氧化物质，是调剂春节前后的“冬缺”和“春淡”的理想蔬菜，但极易失水或受机械损伤加速衰败，常温储藏3~4 d就会黄化萎蔫，采后损失严重.郭玉花等[3]研究发现包装产生的水雾会加速小白菜的腐烂；吴子龙等[13]采用精油熏蒸处理小白菜可达到抑菌保鲜目的；赵昕等[14]通过喷洒精油保鲜液处理可将小白菜的失重率、叶绿素质量分数和Vc质量分数的损失率降到最低，保存效果最理想；马涌航等[11]研究发现适宜阻隔性的包装材料可降低生菜水分流失，保持细胞活性，减缓叶绿素的降解，有效延长生菜的贮藏时间；周婧等[4]研究发现高密度聚乙烯(HDPE)包装材料较好地保持了叶用生菜的叶绿素质量分数和感官品质，延缓了呼吸高峰的出现，抑制PPO酶活性.高建晓等[15]研究发现6-BA浸泡处理可延缓上海青贮藏品质的下降.但针对重庆市地产蔬菜瓢儿菜短期贮运保鲜特别是包装材料缺乏系统研究，目前该市瓢儿菜短期贮运保鲜大多采用塑料筐、泡沫箱散装，不同程度地造成腐损，也影响了品质和商品性.本文针对瓢儿菜短期贮运保鲜开展不同包装材料、4 ℃贮藏条件下品质和生理生化相关指标变化分析，目的是筛选适宜的瓢儿菜包装材料，满足精品蔬菜配送需求.
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由重庆市武隆区重庆渝蔬农业发展有限公司位于木根的生产基地采后立即运回实验室，挑选大小相近，外观完好、无折断，新鲜翠绿的瓢儿菜立即用普通PE袋(佛山市东合众包装制品有限公司，厚度5丝)、4孔OPP自粘袋(上海仁物包装材料有限公司，厚度6丝)、微孔气调保鲜袋(山东新沅生态农业发展有限公司，厚度4丝)进行包装处理，每包质量控制在(250±5) g，每个处理重复3次，包装后立即贮藏在4 ℃冷库内.
仪器：CM-2300d型分光测色计，SPAD-502型叶绿素测定仪，柯尼卡美能达(中国)投资有限公司；754E型紫外可见分光光度计，上海光学仪器厂；MIC-500-CO2-IR型二氧化碳测定仪，深圳逸云天电子有限公司.
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参照谢晶等[1]制定的上海青感官评价标准(表 1)对瓢儿菜贮藏期间的感官属性进行评价，按照7级评分制(1为极不好，2为非常不好，3为不好，4为一般，5为好，6为非常好，7为极好)，对其评分求平均值，3.5分以下为不被接受的切分点.
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参照刘亭等[16]方法.选择体积合适的真空干燥器，顶部磨口塞换成橡胶塞，在橡胶塞上打两个小圆孔，分别插入玻璃管，其中一根需插到罐底，另一根插在罐口处，再在玻璃管上套上橡皮管，用两个铁夹夹住.把所需测定的蔬菜取适当质量放入密闭真空干燥器中，密封.打开二氧化碳测定仪，预热5 min，把仪器进气管和出气管分别接到真空干燥器上，在蔬菜放入干燥器中后10，20，30 min时间点记录仪器读数(t)，呼吸强度计算公式：
式中，C1为t1时刻密闭容器中CO2浓度，%；C2为t2时刻密闭容器中CO2浓度，%；V为密闭容器的容积，L；M为CO2的摩尔质量，g/mol；V0为CO2的摩尔体积，g/mol；m为测定用蔬菜的质量，kg.
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采用称重法，重复3次，取平均值，失重率计算公式：
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采用2，6-二氯酚靛酚法[17]测定瓢儿菜Vc质量分数.
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采用便携式叶绿素测定仪SPAD-502进行测定，选取部位为瓢儿菜叶片中脉右上部位，每组测量30片样品，每次测试挑选具有代表整体特质的叶片.
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色差计CM-2300d经白板校准后，测定瓢儿菜叶片中脉右上部位，每组测量30片样品，每次测试挑选具有代表整体特质的叶片.测试采用国际标准CIE-L*a*b*品质系统[18]，得到ΔE总色差参数.
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采用郝再彬等[19]方法称取瓢儿菜叶片0.5g，加入2 mL质量分数为10%的三乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再后转置10 mL的容量瓶中.在4 000 r/min离心10 min，上清液即为样品提取液.吸取离心的上清液2 mL(对照加2 mL蒸馏水)，加入2 mL质量分数为0.6%的硫代巴比妥酸(TBA)溶液，混匀，将混合液于沸水上反应15 min，迅速冷却后再4 000 r/min离心10 min，取上清液测定450，532和600 nm波长下的吸光度值，以0.6%的硫代巴比妥酸(TBA)为空白.按公式计算MDA质量分数(CMDA).
式中，A600, A532和A450分别代表 600, 532和450 nm波长下吸光度值.
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SOD酶活性测定采用孙群等[20]的方法，称1 g瓢儿菜叶片于预冷的研钵中，加2 mL经预冷处理0.1 mol/L，pH值为7.8的磷酸缓冲液在冰浴中研磨均匀，再采用上述磷酸缓冲液定容至10 mL的容量瓶中.取5 mL提取液于4 ℃下12 000 r/min离心20 min，上清液为SOD酶粗提取液.取0.1 mL SOD酶粗提液于具塞刻度试管中，依次加入50 mmol/L，pH值为7.8的磷酸缓冲液1.5 mL溶液，130 mmol/L甲硫氨酸(Met)溶液0.3 mL，750 μmol/L氯化硝基四氮唑蓝(NBT)溶液0.3 mL，20 μmol/L核黄素溶液0.3 mL，100 μmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)溶液0.3 mL，蒸馏水0.5 mL，光下对照组加入0.1 mL的蒸馏水，暗中对照组的试管也加入0.1 mL的蒸馏水，并用双层黑色纸套遮盖.全部试剂加完后摇匀，将所有试管置于4只荧光灯(约2 500~3 000 lx)显色，反应30 min.反应结束后用黑布遮盖试管终止反应.以暗中对照管做空白(调零).在560 nm下测定吸光度值，记录测定数据.按公式计算酶活性(ASOD)如下：
式中，A0为光下对照管的吸光度；As为样品测定管吸光度；Vt为样品提取液总体积；Vs为测定时粗酶液量(mL)；t为显色反应时间(min)；FW为样品的鲜质量(g).
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所有数据均平行测定3次，取平均值，显著性采用SPSS 18.0软件进行分析(p＜0.05).
1.1. 材料及处理
1.2. 实验方法
1.2.1. 感官评价
1.2.2. 呼吸强度测定
1.2.3. 失重率测定
1.2.4. Vc质量分数测定
1.2.5. 相对叶绿素质量分数测定
1.2.6. 总色差(ΔE)的测定
1.2.7. 丙二醛(MDA)质量分数测定
1.2.8. 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定方法
1.3. 数据处理
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感官品质是果蔬贮运保鲜最重要的商品品质[21]. 图 1感官评分结果显示：不同包装瓢儿菜在贮运期间感官评分均呈下降趋势，但包装感官评分下降趋缓，散装下降明显.贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋感官评分与散装对照相比分别高6.70%，10.78%和13.56%；贮运3 d分别高10.10%，15.85%和19.51%；贮运5 d分别高13.96%，23.33%和29.45%；贮运7 d分别高14.32%，43.95%和57.78%；贮运9 d分别高23.26%，68.77%和96.68%，PE袋与散装对照差异有统计学意义(p＜0.05)，4孔OPP自粘袋和微孔气调保鲜袋与散装对照相比差异有统计学意义(p＜0.01)，其中微孔气调保鲜袋保鲜效果特别明显，贮运9 d相当于散装对照前3 d的感官品质.
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呼吸强度是果蔬贮藏过程中反映贮运保鲜效果的重要指标之一[22].过于旺盛的呼吸强度会使得果蔬营养物质消耗，导致质量减少、失水、品质下降和衰老.因此，采后贮藏过程中应尽量减小呼吸消耗. 图 2呼吸强度变化情况显示：随着贮运保鲜时间的延长，呼吸强度呈逐渐下降趋势.贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋呼吸强度与散装对照相比分别低15.17%，39.59%和33.28%；贮运3 d与散装对照相比分别低17.25%，8.15%，28.66%；贮运5 d与散装对照比分别低17.69%，17.91%和33.81%；贮运7 d与散装对照比分别低20.44%，9.25%和27.64%；贮运9 d与散装对照比分别低26.83%，29.81%和30.97%，PE袋、4孔OPP自粘袋和微孔气调保鲜袋与散装对照呼吸强度相比差异有统计学意义(p＜0.01)，尤以微孔气调保鲜袋抑制呼吸强度的效果最佳. 3种包装材料瓢儿菜呼吸强度始终维持在相对较低的水平，这对延长瓢儿菜货架期十分有利.
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水分是维持蔬菜细胞正常生理机能、保持细胞膨压及新鲜品质的必要条件.一般蔬菜失水达5%时，即表现出疲软、皱缩、萎蔫，甚至变质.失质量主要由果蔬呼吸作用和蒸腾作用导致，与果蔬新鲜度和色泽相关[23].尤其是含水量高的叶菜，叶片表面积大、气孔多，极易散失水分，加之呼吸消耗更加剧失质量萎蔫，因此失重率可以作为衡量瓢儿菜贮藏品质的重要指标.从图 3可以看出，包装与散装对照组失重率均呈上升趋势.散装贮运3 d即表面出明显萎蔫，而经过包装的瓢儿菜贮运9 d仍失水不明显. PE袋、4孔OPP自粘袋和微孔气调保鲜袋与散装对照失质量相比差异有统计学意义(p＜0.01).整个贮运过程PE袋失质量最少、微孔气调保鲜袋次之、4孔OPP自粘袋轻微失质量，但完全能满足贮运保鲜的需求.
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抗坏血酸(Vc)是植物体内的抗氧化物质，具有一定的还原性，可清除果蔬体内因氧化作用产生的自由基，可抑制果蔬体内非酶促褐变，也有研究表明还原型抗坏血酸可以与酶促褐变的中间产物反应，从而阻止褐色素的形成，这些变化可以有效减缓果蔬的衰老进程. Vc不仅作为维持人体正常生理代谢不可缺少的主要维生素之一，而且在果蔬营养品质分析方面具有重要位置，常作为评价果蔬贮藏、流通、加工等方面的重要指标. 图 4结果显示，贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋Vc质量分数与散装对照相比分别高2.29%，2.72%和9.68%；贮运3 d与散装对照相比分别高10.53%，12.12%和5.67%；贮运5 d与散装对照相比分别高12.60%，3.96%和16.65%；贮运7 d与散装对照相比分别高-6.81%，-3.31%和-1.75%；贮运9 d与散装对照比分别高18.48%，8.79%和31.33%，PE袋和微孔气调保鲜袋与散装对照相比差异有统计学意义(p＜0.01)，4孔OPP自粘袋与散装对照相比差异无统计学意义.
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叶绿素是植物生理活动的最重要指标之一.叶绿素不但影响到植物光合作用，而且对绿叶菜保鲜效果及其生产销售具有重大意义[24].随着贮藏时间延长，叶菜无法进行光合作用，叶绿素会逐渐分解而使绿色消退，鲜嫩度下降从而导致菜叶的黄化，叶绿素质量分数是体现叶菜贮藏品质的重要指标[25].包装后的生菜因水分损失减少，叶绿素降解的速度也相应降低[26]. 图 5结果显示：随着贮运保鲜时间的延长，瓢儿菜相对叶绿素SPAD值变化趋势不明显.贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋SPAD值与散装对照相比分别高4.77%，1.67%和4.44%；贮运3 d与散装对照相比分别高4.51%，1.60%和3.52%；贮运5 d与散装对照相比分别高4.55%，2.62%和4.29%；贮运7 d与散装对照相比分别高4.06%，1.90%和4.84%；贮运9 d与散装对照相比分别高3.03%，1.86%和4.92%，PE袋、4孔OPP自粘袋和微孔气调保鲜袋与散装对照SPAD值相比差异无统计学意义(p＞0.05).相比而言，PE袋和微孔气调保鲜袋效果较好.
总色差ΔE反映了叶片因叶绿素降解而黄化的情况[27]，图 6结果显示：贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋ΔE值与散装对照相比分别低0.53%，-3.96%和2.58%；贮运3 d与散装对照相比分别低0.52%，2.35%和7.11%；贮运5 d与散装对照相比分别低7.15%，3.93%和9.26%；贮运7 d与散装对照相比分别低5.99%，2.12%和7.64%；贮运9 d与散装对照相比分别低6.54%，2.19%和10.83%. 4孔OPP自粘袋与散装对照相比差异无统计学意义(p＞0.05). PE袋与散装对照相比差异有统计学意义(p＜0.05).微孔气调保鲜袋与散装对照相比差异有统计学意义(p＜0.01)，有利于瓢儿菜色泽的保持.比较相对叶绿素SPAD值和总色差ΔE值显示两者具有一定关联性，但总色差ΔE更能有效反映色泽的变化.
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丙二醛(MDA)是细胞膜质过氧化的产物，与细胞膜的完整性密切相关.已被证明来自不饱和脂肪酸的降解，对细胞有直接毒害作用，能加剧细胞膜的损伤，同时也是细胞衰老的一种标志[28].因此，在植物衰老生理和抗性生理研究中MDA质量分数是一个常用指标，可通过MDA质量分数反映膜脂过氧化程度，间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性. MDA值越大，表示电解质的渗漏量越多，细胞膜受损害程度越重. 图 7结果显示：贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋MDA质量分数与散装对照相比分别低5.56%，9.26%和10.58%；贮运3 d与散装对照相比分别低1.69%，14.22%和16.15%；贮运5 d与散装对照相比分别低4.68%，15.81%和21.83%；贮运7 d与散装对照相比分别低3.97%，12.34%和22.80%；贮运9 d与散装对照相比分别低6.63%，14.62%和21.05%.微孔气调保鲜袋、PE袋抑制MDA累积的效果明显优于散装对照(p＜0.01)，而PE袋效果不明显(p＞0.05).相比而言，微孔气调保鲜袋延缓MDA积累水平更优于4孔OPP自粘袋.
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SOD是植物体内重要的抗氧化酶，在植物细胞内通过歧化超氧阴离子O2-生成H2O2和O2，从而降低细胞内活性氧水平[29]，可保护细胞膜结构，使植物抗逆性、抗病性加强，对逆境胁迫忍受度增加. 图 8结果显示：贮运1 d后PE袋、4孔OPP自粘袋、微孔气调保鲜袋SOD值与散装对照相比分别高0.36%，11.40%和23.40%；贮运3 d与散装对照相比分别高2.33%，18.56%和20.47%；贮运5 d与散装对照相比分别高6.30%，31.48%和41.73%；贮运7 d与散装对照相比分别高11.05%，30.60%和32.92%；贮运9 d与散装对照相比分别高28.66%，41.35%和47.27%.前期PE袋与散装对照相比差异无统计学意义(p＞0.05)，而7~9 d后差异有统计学意义(p＜0.01)；微孔气调保鲜袋、4孔OPP自粘袋与散装对照SOD值相比差异有统计学意义(p＜0.01)，能显著提高瓢儿菜SOD酶活性水平，延缓衰老.
2.1. 不同包装材料对瓢儿菜感观品质的影响
2.2. 不同包装材料对瓢儿菜呼吸强度的影响
2.3. 不同包装材料对瓢儿菜失重率的影响
2.4. 不同包装材料对瓢儿菜Vc质量分数的影响
2.5. 不同包装材料对瓢儿菜叶绿素SPAD值及色差的影响
2.6. 不同包装材料对瓢儿菜丙二醛(MDA)质量分数的影响
2.7. 不同包装材料对瓢儿菜SOD酶活性的影响
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1) PE袋、4孔OPP自粘袋与微孔气调保鲜袋对瓢儿菜感官、色泽、失重率、呼吸强度、Vc、膜脂过氧化产物MDA及抗衰老酶SOD活性均有不同程度的影响，尤以微孔气调保鲜袋效果最佳.研究表明，微孔气调保鲜袋可有效保持贮运货架期内瓢儿菜的感官和色泽，抑制其呼吸强度，减少其失质量，维持其相对较高的Vc质量分数，抑制其膜脂过氧化产物MDA的累积和保持较高的SOD酶活性，从而有利于瓢儿菜商品性的保持和延缓其品质劣变.
2) 分析SOD酶活性变化趋势和衰败特征指标MDA积累情况和感官评分发现，微孔气调保鲜袋包装的瓢儿菜可维持相对较高的抗氧化酶活性，MDA累积程度最低，感官评分也最高，说明SOD酶活性、MDA质量分数、瓢儿菜商品性三者之间具有相关性.
3) 通过色差计测定总色差ΔE和叶绿素测定仪测得的SPAD值比较发现，两者均可用于叶菜货架期评价指标. SPAD值简便，基本能反映绿色蔬菜叶片黄化情况，但总色差ΔE更精确.