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烟草作为我国重要的经济作物，其苗期管理对烟草的生长发育和品质提升至关重要[1]. 工厂化漂浮育苗是我国烤烟育苗的主导方式，具有占地面积小、成苗率高和管理方便等优点[2]. 由于豫中烟区春季气候多变，烟草育苗过程中，极端气候条件的环境胁迫可导致烟苗生长缓慢、代谢受阻、抗性下降，出现隐性感染烟苗，严重影响烟草产量和品质[3-4]. 漂浮育苗隐性感染烟苗病害为典型的非侵染性病害，危害损失大，防治难度高. 研究表明，植物生长调节剂的使用可以促进烟草的生长发育并提高其抗病抗逆性. 含氨基酸水溶肥料能够促进烟苗根系发育和植物生长，增强植株的养分吸收能力和抗逆性，并且可以减少大田期烟草花叶病的发生[5-6]. 海藻寡糖多肽聚合氨基酸可以调节植物的生理代谢过程，促进植物生长以及对逆境的适应性[7]. 氨基寡糖素作为天然有机物，可以促进烟草的生长发育并减少病毒病的发生[8]. 极细链格孢激活蛋白作为一类植物内源激素，可以激活植物的防御反应，提升其抗病抗逆性[9]，田间使用可以降低烟草病毒病的发生率[10]. 次氯酸钠在烟草生产中常被用作消毒剂、清洁剂，可有效减少潜在病原体传播，从而促进烟草的生长发育[11].
对于非侵染性病害，常规化学植物生长调节剂难以有效利用，防治效果普遍较差. 根据前期研究，使用植物生长调节剂可提高烟苗抗病抗逆性，有效提升烟苗的生产效益和品质. 因此，筛选不同植物生长调节剂及其不同配比组合，对于防治隐性感染烟苗病害具有重要的应用价值和科学意义. 本研究探究了多种植物生长调节剂单剂及其复配组合对漂浮育苗隐性感染烟苗病害的防治效果，通过测定对比不同处理烟苗的农艺性状、根系活力和抗病抗逆酶活性变化，明确各处理对漂浮育苗隐性感染烟苗病害的防治效果，为解决漂浮育苗隐性感染烟苗病害问题提供数据支撑和防治建议.
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供试烟苗为漂浮育苗大棚自然发病烟苗，品种为“中烟100”，苗盘为200穴常规泡沫漂浮育苗盘，苗龄为播种后35 d，烟苗处于生根期.
供试植物生长调节剂：安必神水剂为拜尔中国生产，田佰利水剂为英国兰博生物化学有限公司生产，阿泰灵可湿性粉剂为北京中保绿农科技集团有限公司生产，10%次氯酸钠为天津市富宇精细化工有限公司生产.
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试验时间为2022年4—6月，试验采用双重对照组设计，发病烟苗清水处理为第一对照组(CK1)，健康烟苗清水处理为第二对照组(CK2). 处理组根据隐性感染烟苗发病等级分别选择1级烟苗、2级烟苗、3级烟苗和4级烟苗进行试验，设置次氯酸钠1 000倍液、2 000倍液和4 000倍液，安必神500倍液、生根液500倍液和阿泰灵500倍液6种单剂，以及次氯酸钠3种稀释倍数，分别与3种植物生长调节剂1∶1复配形成9种组合处理，本试验共设置17个处理(表 1). 每隔2 d对烟苗进行灌根，每株1 mL，灌根3次，处理后14 d后调查，每处理不少于40株. 试验期间，温箱温度为(22±1)℃，湿度(50%±10%)RH，光暗比16 h∶8 h，光强(10 000±2 000)lx.
隐性感染烟苗分级标准：
0级(健康)烟苗：盘面上烟苗茁壮、无黄化、无缺苗；白色主根清晰、健壮、根部无症状.
1级烟苗：盘面上烟苗无缺苗，少量(≤5%)烟苗弱小、黄化；白色主根数量和长度基本正常，但烟苗高度略低于正常，极个别(≤5%)烟苗的主根尖端有轻微水渍状或褐变.
2级烟苗：盘面上烟苗基本正常，但5%~25%的烟苗出现明显弱小、发黄；根长明显短于正常，气生根数量减少，约1/3根系尖端出现水渍状或褐变.
3级烟苗：盘面上25%~50%的烟苗出现黄化甚至死苗，烟苗明显高度低于正常；1/3~1/2的主根稀疏、短小、根系尖端褐变甚至腐烂.
4级烟苗：盘面上50%以上的烟苗出现明显的黄化甚至死苗，烟苗生长极为缓慢，叶色无光泽、无弹性；1/2以上的主根细弱、短小，根系尖端褐变甚至腐烂.
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各处理选取10株烟苗，按照《烟草农艺性状调查测量方法》(YC/T 142—2010)测定烟苗农艺性状，包括根长、侧根数、最大叶片的叶长和叶宽，并计算叶片的叶面积，使用植物营养测定仪(浙江脱普云农科技股份有限公司，TYS-4N)测定叶绿素含量.
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各处理随机选取5株，按照上海尚宝科技有限公司试剂盒说明书，采用TTC比色法，使用紫外分光光度计(上海翱艺仪器有限公司，UV-1800)测定烟苗根活力.
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各处理随机选取5株，按照北京索莱宝科技有限公司试剂盒说明书，采用微量法(Spectrophotometer)，使用酶标仪(美国赛默飞，Multiskan FC)测定丙二醛(MDA)摩尔质量.
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试验数据采用Microsoft Excel 2019和IBM SPSS Statistics 23软件进行整理分析，采用Duncan's New Multiple Range Test对各处理指标进行单因素方差分析(p<0.05)，使用Origin 2022绘制柱形图.
1.1. 供试材料
1.2. 试验设计
1.3. 测定指标
1.3.1. 农艺性状
1.3.2. 根活力测定
1.3.3. MDA摩尔质量测定
1.4. 数据处理与统计学分析
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隐性感染后期，烟苗生长极为缓慢，叶色无光泽，无弹性，出现明显的黄化和死苗情况. 隐性感染严重影响了烟苗的根系，随着发病等级的增加，烟苗根系弱小，侧根数和根长降低(图 1).
隐性感染同时还显著影响了烟苗根系的MDA摩尔质量(p= 0.001)，MDA摩尔质量随发病等级的增加呈增高趋势，隐性感染3级和4级烟苗的MDA摩尔质量明显高于0级烟苗，分别增加了66.06%和91.19%. 隐性感染对烟苗的根活力影响明显(p= 0.000)，其中2级、3级烟苗和4级烟苗的根活力明显低于0级烟苗，仅为0级烟苗的76.23%，41.72%和30.07%(图 2).
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由试验结果可知，对不同发病等级根长进行比较，不同处理对1级、3级烟苗根长影响更明显，而2级、4级烟苗影响不明显. 同一发病等级，不同处理间根长进行比较，1级烟苗中，T12处理明显长于其他处理，差异具有统计学意义，较CK1提升了76.36%；2级烟苗中，T9和T15处理效果优于其他处理，较CK1分别提升了33.33%和32.74%，T12处理次之，较CK1提升了32.14%；3级烟苗中，T12处理明显高于其他处理，差异具有统计学意义，较CK1提升了65.28%；4级烟苗中，T15和T10处理对根长有一定的促进作用，较CK1提升了13.92%和10.13%. 与CK2比较，1级烟苗中，T4、T5、T11和T12处理烟苗根长达CK2(0级烟苗)水平以上，其他处理则低于CK2；其中，T12处理1级、2级、3级和4级烟苗的根长分别为CK2的118.53%，90.43%，96.95%和66.80%(表 2).
对不同发病等级侧根数进行比较，不同处理对1级、2级、3级烟苗侧根数影响更明显，而4级烟苗影响不明显. 不同处理中，T12对侧根数有明显的提升作用，1级、2级、3级和4级烟苗较CK1分别提升了57.94%，77.18%，107.08%，21.55%，和CK2(0级烟苗)比较，分别为CK2的108.45%，92.96%，82.39%和49.65%(表 2).
对不同发病等级烟苗最大叶面积进行比较，不同处理对1级、2级和3级烟苗最大叶面积影响更明显，而4级烟苗影响不明显. 同一发病等级，不同处理最大叶面积比较，1级烟苗中，T9处理最大叶面积最高，较CK1提升了47.50%，T12处理较CK1提升了17.18%；2级烟苗中，T10处理最大叶面积最高，较CK1提升了58.74%，T12处理次之，较CK1提升了54.67%；3级烟苗中，T15处理最大叶面积最高，较CK1提升了101.13%；4级烟苗中，T12处理最大叶面积最高，较CK1提升了21.75%(表 3).
对不同发病等级烟苗叶绿素含量进行比较，不同处理对1级、2级、3级和4级烟苗的叶绿素含量影响均很明显. 同一发病等级烟苗，不同处理叶绿素含量比较，1级烟苗，T11处理叶绿素最高，较CK1提升了63.72%，T12处理次之，较CK1提升了55.67%；2级烟苗中，T10、T11和T12处理烟苗叶绿素含量明显高于其他处理，较CK1分别提升了25.58%，28.44%和25.89%；3级烟苗中，T10、T11和T12处理烟苗叶绿素含量明显高于其他处理，较CK1分别提升了25.22%，24.78%和20.80%. 4级烟苗，T3和T10处理高于其他处理，较CK1提升了25.05%和10.98%. 不同发病等级烟苗中，T11和T12处理烟苗叶绿素含量最高，1级、2级、3级、4级烟苗分别为CK2(0级烟苗)的118.29%，113.31%，98.81%，70.15%和112.47%，110.07%，95.66%，79.40%. 综合来看，T11和T12处理烟苗农艺性状较好(表 3).
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不同发病等级烟苗MDA摩尔质量比较，不同处理对1级、2级和3级烟苗MDA摩尔质量有明显影响，而4级烟苗影响不明显. 同一发病等级，不同处理MDA摩尔质量比较，1级烟苗中，除T1处理外，其他处理MDA摩尔质量均低于CK1，MDA摩尔质量最低的为T2和T6处理，较CK1组降低了49.03%和42.87%；此外，T5，T9，T11，T12，T13和T14处理MDA摩尔质量也明显低于CK1，分别降低了29.16%，33.94%，28.79%，31.93%，30.36%和29.35%. T2，T6，T9，T11，T12，T13和T14等处理可以使1级烟苗MDA摩尔质量降至CK2(0级烟苗)水平以下(图 3).
2级烟苗中，除T7和T13处理外，其他处理MDA摩尔质量均低于CK1，MDA摩尔质量最低的为T9和T12处理，较CK1组分别降低了36.54%和37.20%，此外T2，T5和T11处理MDA摩尔质量较低，较CK1组分别降低了25.92%，33.11%和32.45%；T2，T5，T9，T11和T12等处理可以使2级烟苗MDA摩尔质量降至CK2(0级烟苗)水平以下(图 3).
3级烟苗中，T1，T2，T6，T10，T11，T12和T15处理MDA摩尔质量低于CK1，其他处理MDA摩尔质量均高于CK1；T6，T10，T11，T12和T15处理MDA摩尔质量较CK1组分别降低了20.25%，17.66%，16.90%，14.96%和12.40%；所有处理MDA摩尔质量均高于CK2，植物生长调节剂处理无法使3级烟苗MDA摩尔质量降至CK2(0级烟苗)水平(图 3).
4级烟苗中，T1，T2，T3，T4，T5，T7，T10，T11，T12和T15处理MDA摩尔质量低于CK1，较CK1组分别降低了0.32%，3.51%，13.12%，8.64%，13.12%，3.10%，3.52%，10.68%，6.40%和9.92%，但所有处理均高于CK2，植物生长调节剂处理无法使4级烟苗MDA摩尔质量降至CK2(0级烟苗)水平(图 3).
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不同发病等级烟苗根活力比较，不同处理对1级、2级、3级和4级烟苗烟苗根活力有明显影响. 1级烟苗中，除T1，T3和T8处理外，其他处理均提升了1级烟苗的根活力，其中，T6，T12和T13处理较CK1分别提升了32.07%，41.29%和33.84%. T12处理提升1级烟苗根活力至CK2(0级烟苗)水平的102.91%，T6和T13处理烟苗根活力至CK2处理的96.19%和97.48%(图 4).
2级烟苗中，除T1，T3，T5，T7，T9和T15处理外，其他处理均提升了2级烟苗的根活力，其中，T2，T11，T12和T13处理明显提升了烟苗根活力，较CK1分别提升了16.42%，17.45%，28.47%和28.47%. T12处理可以提升2级烟苗根活力至CK2(0级烟苗)水平的79.92%，T10和T11处理2级烟苗根活力为CK2(0级烟苗)的71.09%和73.20%(图 4).
3级烟苗中，除T4，T8和T13处理外，其他处理均提升了3级烟苗的根活力，其中，T6，T7，T10，T12，T14和T15处理明显提升了烟苗根活力，较CK1分别提升了28.00%，36.09%，46.17%，34.59%，29.51%和24.44%；所有处理烟苗根活力均低于CK2，T7和T10处理的根活力最高，但仅为CK2(0级烟苗)的66.59%和69.06%，T12处理根活力仅为CK2(0级烟苗)的65.85%，各处理3级烟苗平均根活力仅为CK2(0级烟苗)的56.72%(图 4).
4级烟苗中，T3，T4，T5，T6，T9，T10，T11，T12和T15处理对4级烟苗根活力有一定的提升作用，其中T9，T10，T12处理根活力高于其他处理，较CK1分别提升了21.43%、29.19%和24.53%，但仅为CK2(0级烟苗)的35.96%，38.26%和36.88%. 各处理4级烟苗平均根活力仅为CK2(0级烟苗)的30.75%. 综合来看T10和T12处理对隐性感染烟苗根活力提升效果最好(图 4).
2.1. 隐性感染烟苗的理化性状
2.2. 不同处理对隐性感染烟苗农艺性状的影响
2.3. 不同处理对隐性感染烟苗根系MDA摩尔质量的影响
2.4. 不同处理对隐性感染烟苗根活力的影响
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烟草农艺性状可以反映出其生长状态和抗病能力[12]，常作为评价植物生长调节剂应用效果的重要指标之一[13-14]. 本研究发现，隐性感染烟苗的根长、侧根数等农艺性状受到了明显的抑制. 单剂对隐性感染烟苗农艺性状的提升效果较差，复配T12(次氯酸钠2 000倍液+阿泰灵500倍液)处理对隐性感染各级烟苗农艺性状均有提升作用，复配T10(次氯酸钠2 000倍液+安必神500倍液)和T11(次氯酸钠2 000倍液+生根液500倍液)处理次之. 复配T12处理较于CK1(清水对照)，提升了各级烟苗的根长、侧根数、最大叶面积和叶绿素含量，1级烟苗处理后，各指标可达CK2(0级烟苗)的118.53%，108.45%，76.45%和112.47%，2级烟苗处理后可达CK2的90.43%，92.96%，95.30%和110.07%，3级烟苗处理后可达CK2的96.95%，82.39%，74.01%和95.66%，4级烟苗处理后可达CK2的66.80%，49.65%，68.00%和79.40%. 阿泰灵和次氯酸钠复配施药后可以快速提升隐性感染1级、2级和3级烟苗的农艺性状，对4级烟苗农艺性状提升效果较差. 鲁黎明等[15]的研究同样认为低浓度次氯酸可以提升烟苗的农艺性状. 阿泰灵有效成分为氨基寡糖素和极细链格孢激活蛋白，具有杀菌和促生的效果，可以促进根系的分支和伸展，能有效提升烟苗的农艺性状[16-17]. 此外，安必神的主要有效成分为氨基酸水溶肥料[18]，生根液的主要有效成分为海藻寡糖多肽聚合氨基酸[19]，均对作物的生长和农艺性状有促进作用.
MDA摩尔质量是衡量植物氧化损伤程度的指标，其摩尔质量增加表明植物受到了氧化损伤[20]. 本研究发现，烟苗隐性感染后，根系MDA摩尔质量增高，部分处理可以一定程度上降低MDA摩尔质量，从而降低氧化损伤[21]. 单剂中，T6(阿泰灵500倍液)处理可以极大程度地降低MDA摩尔质量. 复配T12(次氯酸钠2 000倍液+阿泰灵500倍液)和T11(次氯酸钠2 000倍液+生根液500倍液)处理对隐性感染各级烟苗的MDA摩尔质量的降低效果较好，与CK1(清水对照)比较，1级、2级、3级烟苗MDA摩尔质量分别降低了31.93%，37.20%，14.96%和28.79%，32.45%，16.90%，并且可以使1级和2级烟苗降至CK2(0级烟苗)水平以下，和陈文晋等[22]的研究结果一致，其认为氨基寡糖素可以调节植物的抗氧化系统，减少氧化应激对烟苗根系的损害. 同时，张志刚等[23]的研究结果表明，极细链格孢蛋白可以诱导激发植物抗逆和抗病系统，从而降低烟苗根系MDA摩尔质量，本试验结论得到了其研究结果支持.
根活力是衡量植物受到逆境胁迫后根系对环境的适应能力的指标，活性增加表明植物根系对逆境的适应能力提高，抗病抗逆性增强[24-25]. 本研究发现，隐性感染极大程度地降低了烟苗的根活力，可使2级、3级和4级烟苗平均根活力降至0级烟苗的76.23%，41.72%和30.07%，对烟苗根系的损伤很高. 植物生长调节剂不同程度地提升了烟苗的根活力，单剂中以T6(阿泰灵500倍液)处理表现最佳. 复配T12(次氯酸钠2 000倍液+阿泰灵500倍液)和T13(次氯酸钠4 000液+安必神500倍液)处理对1级烟苗和2级烟苗的提升效果较好，T12和T10(次氯酸钠2 000倍液+安必神500倍液)处理对3级和4级烟苗根活力提升效果较好. 其中复配T12处理，隐性感染1级、2级、3级和4级烟苗根活力较CK1(清水对照)增加了41.29%，28.47%，34.59%和24.53%，可提升至CK2(0级烟苗)的102.91%，79.92%，65.85%和36.88%. 阿泰灵辅以次氯酸钠施药后可以快速提升隐性感染烟苗的根活力，可提升1级烟苗至0级烟苗水平，对2级、3级和4级烟苗农艺性状提升效果较差. 低浓度次氯酸钠处理通过增加烟苗的根部吸水能力，增加了烟苗根活力[26]. 另外，阿泰灵主要成分极细链格孢激活蛋白作为一类植物内源激素，可以激活植物的防御反应，进而提升其根活力[27].
次氯酸钠2 000倍液和阿泰灵500倍液1∶1复配穴盘注射灌根，可以明显提升隐性感染烟苗的农艺性状和根活力，并降低MDA摩尔质量. 综合各项指标分析，生产中应抓住1级烟苗防治，根据当年烟苗供应情况酌情防治2级烟苗，3级和4级烟苗防治成本高，提升效果有限，且移栽大田后高发根茎类病害，不建议进行投入防治.