中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究

孟庆玲,乔军,才学鹏

西南师范大学学报(自然科学版)

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中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究

孟庆玲,乔军,才学鹏. 中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究[J]. 西南师范大学学报(自然科学版), 2007, 32(5).

引用本文:

孟庆玲,乔军,才学鹏. 中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究[J]. 西南师范大学学报(自然科学版), 2007, 32(5).

Molecular Cloning and Expression of Chinese White Rabbit Interleukin-6 Gene[J]. Journal of Southwest China Normal University(Natural Science Edition), 2007, 32(5).

Citation:

Molecular Cloning and Expression of Chinese White Rabbit Interleukin-6 Gene[J]. Journal of Southwest China Normal University(Natural Science Edition), 2007, 32(5).

中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究

孟庆玲,乔军,才学鹏

中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州,730046;甘肃农业大学,动物医学院,兰州,730070,中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州,730046

Molecular Cloning and Expression of Chinese White Rabbit Interleukin-6 Gene

摘要: 运用RT-PCR技术对用ConA刺激的中国白兔外周血淋巴细胞(PMBCr)进行了扩增,将纯化后的PCR产物克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定.结果中国白兔IL-6基因全长726 bp,编码242个氨基酸,其中前26个氨基酸残基构成信号肽序列.与不同物种IL-6基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列有一定的差异.在推导的中国白兔IL-6氨基酸序列中,在108-110位存在1个潜在的N-联糖基化位点,同时存在9个Cys残基.将pTIL-6双酶切,回收目的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-6,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为29.5kDa的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的16.2，.
- 中国白兔,白介素6基因,分子克隆,表达

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中国白兔IL-6基因的分子克隆及其表达研究

孟庆玲,乔军,才学鹏

中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州,730046;甘肃农业大学,动物医学院,兰州,730070,中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州,730046

关键词:

中国白兔,白介素6基因,分子克隆,表达

摘要: 运用RT-PCR技术对用ConA刺激的中国白兔外周血淋巴细胞(PMBCr)进行了扩增,将纯化后的PCR产物克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定.结果中国白兔IL-6基因全长726 bp,编码242个氨基酸,其中前26个氨基酸残基构成信号肽序列.与不同物种IL-6基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列有一定的差异.在推导的中国白兔IL-6氨基酸序列中,在108-110位存在1个潜在的N-联糖基化位点,同时存在9个Cys残基.将pTIL-6双酶切,回收目的基因片段克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-6,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为29.5kDa的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的16.2，.