副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达

袁军,倪丹,方遂,王荣智

西南师范大学学报(自然科学版)

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副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达

袁军,倪丹,方遂,王荣智. 副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达[J]. 西南师范大学学报(自然科学版), 2012, 37(12).

引用本文:

袁军,倪丹,方遂,王荣智. 副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达[J]. 西南师范大学学报(自然科学版), 2012, 37(12).

Cloning and Prokaryotic Expression of VopS Gene of Vibrio parahaemolyticus[J]. Journal of Southwest China Normal University(Natural Science Edition), 2012, 37(12).

Citation:

Cloning and Prokaryotic Expression of VopS Gene of Vibrio parahaemolyticus[J]. Journal of Southwest China Normal University(Natural Science Edition), 2012, 37(12).

副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达

袁军,倪丹,方遂,王荣智

福建农林大学生命科学学院,福州350002;生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州350002,福建农林大学生命科学学院,福州,350002

Cloning and Prokaryotic Expression of VopS Gene of Vibrio parahaemolyticus

摘要: 副溶血弧菌可通过Ⅲ型分泌系统分泌效应毒力蛋白导致真核靶细胞的细胞溶解及细胞凋亡.VopS是Ⅲ型分泌系统中的一个效应毒力因子,能通过抑制NF-κB的活性介导巨噬细胞死亡.实验将效应因子VopS的编码基因克隆到pET28a(+)载体上,成功构建了pET28a(+)-vopS重组质粒,将该质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE分析,发现在分子量约为43 kDa处有一明显蛋白表达条带.用Ni2+-NTA柱亲和层析获得纯化蛋白,浓度为175 mg/L.为进一步研究副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统致病机制提供了材料.
- 副溶血弧菌,Ⅲ型分泌系统,VopS,基因克隆,蛋白表达

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副溶血弧菌VopS效应子基因的克隆与原核表达

袁军,倪丹,方遂,王荣智

福建农林大学生命科学学院,福州350002;生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州350002,福建农林大学生命科学学院,福州,350002

关键词:

副溶血弧菌,Ⅲ型分泌系统,VopS,基因克隆,蛋白表达

摘要: 副溶血弧菌可通过Ⅲ型分泌系统分泌效应毒力蛋白导致真核靶细胞的细胞溶解及细胞凋亡.VopS是Ⅲ型分泌系统中的一个效应毒力因子,能通过抑制NF-κB的活性介导巨噬细胞死亡.实验将效应因子VopS的编码基因克隆到pET28a(+)载体上,成功构建了pET28a(+)-vopS重组质粒,将该质粒转入大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,经SDS-PAGE分析,发现在分子量约为43 kDa处有一明显蛋白表达条带.用Ni2+-NTA柱亲和层析获得纯化蛋白,浓度为175 mg/L.为进一步研究副溶血弧菌Ⅲ型分泌系统致病机制提供了材料.