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大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

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李学学, 黄钟杰, 威则日沙, 等. 大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2019, 41(6): 37-43. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2019.06.006
引用本文: 李学学, 黄钟杰, 威则日沙, 等. 大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2019, 41(6): 37-43. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2019.06.006
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Xue-xue LI, Zhong-jie HUANG, Zerisha WEI, et al. On Distribution of the Wild Resources of Paris daliensis H. Li et V.G. Souku and P. dulongensis H. Li et S. Kuritap and Evaluation of Saponins in Them[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2019, 41(6): 37-43. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2019.06.006
Citation: Xue-xue LI, Zhong-jie HUANG, Zerisha WEI, et al. On Distribution of the Wild Resources of Paris daliensis H. Li et V.G. Souku and P. dulongensis H. Li et S. Kuritap and Evaluation of Saponins in Them[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2019, 41(6): 37-43. doi: 10.13718/j.cnki.xdzk.2019.06.006
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大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

  • 1.

    西南民族大学 药学院, 成都 610041

  • 2.

    四川农业大学 农学院, 成都 611130

  • 3.

    西南民族大学 民族医药研究院, 成都 610041

  • 基金项目: 国家重点研发计划项目（2018YFC1708005）；阿坝州科技条件能力建设和技术示范推广项目（18TJPT0004）；西南民族大学2019年研究生创新型科研项目硕士重点项目（CX2019SZ179）
详细信息
    作者简介:

    李学学(1992-), 男, 彝族, 硕士研究生, 主要从事民族药品种、品质评价和新药资源保护与利用研究 .

    通讯作者: 刘圆, 博士, 教授

  • 中图分类号: R931.2

On Distribution of the Wild Resources of Paris daliensis H. Li et V.G. Souku and P. dulongensis H. Li et S. Kuritap and Evaluation of Saponins in Them

  • 1.

    College of Pharmacy, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China

  • 2.

    College of Agronomy, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611130, China

  • 3.

    Ethnic Medicine Institute, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China

  • 摘要: 评价大理重楼和独龙重楼的野生资源分布情况和皂苷类成分.采用实地调研考察，并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷，增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标，以课题组已经建立的ELSD-UPLC法测定大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分含量.结果表明：1）大理重楼除模式产地云南大理，在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布，野生资源蕴藏量较少；独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡，野生资源蕴藏量更少；2）二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者各省级药材标准中，但是其根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用；3）10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多，主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H；4）在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准，主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷，得出大理重楼和独龙重楼资源均稀少结论，建议高度重视开展人工繁育与资源保护工作；大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷（"宫血宁"有效成分），独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷（"抗病毒颗粒"消炎、抗菌、抗病毒有效成分），可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.
    Abstract: To evaluate the distribution of wild resources and steroid saponins of Paris daliensis H. Li et V.G. Souku and P. dulongensis H. Li et S. Kuritap, an on-the-spot investigation was made, and six kinds of steroid saponins, including the three polyphyllins listed in the 2015 edition of Chinese Pharmacopoeia, and polyphyllin I, gracillin, and polyphyllin H, in them were determined with the ELSD-UPLC method established by our research group. The results were as follows. 1) The model of P. daliensis H. Li et V.G. Souku originated from Dali, Yunnan province. In this investigation, this plant species was newly found to be distributed in Tengchong and Baoshan of Yunnan and in Hezhang of Guizhou as well. Its wild resources were not abundant. P. dulongensis was only found in Dulongjiang township, Nujiang prefecture, Yunnan province, with still less wild resource storage. 2) Neither P. daliensis or P. dulongensis was recorded in the 2015 edition of the Chinese Pharmacopoeia or in the standards of various provincial medicinal materials, but their rhizome was also used as Paridis Rhizoma among the local people in Yunnan and Guizhou. 3) The average total content of saponins in 10 batches of P. daliensis rhizoma was more than 1 time higher than the standard stipulated in Pharmacopoeia, mainly containing polyphyllin Ⅶ and polyphyllin H. 4) The average value of the total content of saponins in only 7 batches of the P. dulongensis collected was up to the standard specified in Pharmacopoeia, and mainly containing polyphyllin I and slender steroidal pennogenin. It is concluded that P. daliensis and P. dulongensis are endangered species with rare resource storage, and their artificial multiplication and resource protection are necessary. The main component of P. daliensis is pennogenin, which is the active ingredient of "Gongxuening"; and that of P. dulongensis is dioscin, which is the active ingredient of the anti-inflammatory, antibacterial and antiviral medicine "Kangbingdu keli".
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  • 图 1  对照品化学结构式

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    图 2  混合对照品

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    图 3  大理重楼色谱图

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    图 4  独龙重楼色谱图

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    图 5  大理重楼UPLC色谱图

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    图 6  独龙重楼UPLC色谱图

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    表 1  样品信息

    试验号 品种 拉丁名 产地 海拔/m 采集日期
    S1 云南省腾冲市 明光乡东营村 1 895 2015/7/6
    S2 官家寨 1 659 2015/7/7
    S3 周家坡 1 566 2015/7/7
    S4 云南省大理市 云龙县 2 171 2015/7/14
    S5 大理重楼 P. daliensis H. Li et V.G. Soukup 松坡脚新寨 2 315 2015/7/15
    S6 理巍山 1 683 2015/7/16
    S7 云南省腾冲市 明光乡白沙河村 1 900 2016/6/6
    S8 勐连乡 1 800 2016/7/25
    S9 明光乡老寨子 1 789 2016/7/26
    S10 界头镇 1 899 2016/7/26
    S11 龙元村 1 604 2015/7/12
    S12 三乡 1 488 2015/7/12
    S13 献九当村 1 559 2015/7/12
    S14 独龙重楼 P. dulongensis H. Li et S. Kurita 云南怒江贡山 独布卡旺孔当村 1 410 2015/7/13
    S15 龙族怒族自治县 1 387 2015/7/13
    S16 麻必当 1 340 2015/7/13
    S17 1 335 2015/7/13
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    表 2  色谱柱和检测器参数

    色谱柱 ELSD检测器漂移管温度/℃ 氮气压力/
    Pa    		 增益 模式 柱温/
    ℃
    ACQUITY BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm，1.7 μm) 55 40 500 冷却 40
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    表 3  梯度洗脱程序

    时间/min 乙腈/% 水/%
    0~1 10~30 90~70
    1~3 30~30 70~70
    3~4 30~40 70~60
    5~8 40~40 60~60
    8~20 40A~50 60~50
    20~22 50A~70 50~30
    22~23 70A~90 30~10
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    表 4  10批大理重楼样品中6个甾体皂苷含量

    %
    编号 Ⅶ H Ⅵ Ⅱ 纤细薯蓣皂苷 I Ⅶ、Ⅵ、Ⅱ、Ⅰ 6个皂苷总和
    S1 0.792 0.705 - - - - 0.792 1.497
    S2 1.558 1.474 - - - - 1.558 3.032
    S3 1.780 1.923 - - - - 1.780 3.703
    S4 0.631 1.936 - - - - 0.631 2.567
    S5 1.532 1.461 - - - - 1.532 2.993
    S6 1.175 1.543 - - - - 1.175 2.718
    S7 0.354 1.987 - - - - 0.354 2.341
    S8 1.602 1.670 - - - - 1.602 3.272
    S9 1.523 0.350 - - - - 1.523 1.873
    S10 1.187 0.875 0.019 - - - 1.206 2.062
    注：“-”表示无.
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    表 5  7批独龙重楼样品中6个甾体皂苷含量

    %
    编号 Ⅶ H Ⅵ Ⅱ 纤细薯蓣皂苷 I Ⅶ、Ⅵ、Ⅱ、Ⅰ 6个皂苷总和
    S11 - - - - 0.807 0.109 0.109 0.916
    S12 - - - - 1.462 0.133 0.133 1.595
    S13 - - - - 1.612 1.101 1.101 2.713
    S14 - - - - 2.811 1.765 1.765 4.576
    S15 - - - - 1.625 0.223 0.223 1.848
    S16 - - - - 2.013 0.351 0.351 2.364
    S17 - - - 0.331 3.211 0.798 1.129 4.340
    注：“-”表示无.
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  • [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社, 2015:260.
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出版历程
  • 收稿日期:  2018-12-06
  • 刊出日期:  2019-06-20

大理重楼和独龙重楼的野生资源分布和皂苷类成分评价

    通讯作者: 刘圆, 博士, 教授
    作者简介: 李学学(1992-), 男, 彝族, 硕士研究生, 主要从事民族药品种、品质评价和新药资源保护与利用研究
  • 1. 西南民族大学 药学院, 成都 610041
  • 2. 四川农业大学 农学院, 成都 611130
  • 3. 西南民族大学 民族医药研究院, 成都 610041
  • 收稿日期:  2018-12-06
基金项目:  国家重点研发计划项目（2018YFC1708005）；阿坝州科技条件能力建设和技术示范推广项目（18TJPT0004）；西南民族大学2019年研究生创新型科研项目硕士重点项目（CX2019SZ179）

摘要: 评价大理重楼和独龙重楼的野生资源分布情况和皂苷类成分.采用实地调研考察，并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷，增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标，以课题组已经建立的ELSD-UPLC法测定大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分含量.结果表明：1）大理重楼除模式产地云南大理，在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布，野生资源蕴藏量较少；独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡，野生资源蕴藏量更少；2）二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者各省级药材标准中，但是其根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用；3）10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多，主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H；4）在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准，主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷，得出大理重楼和独龙重楼资源均稀少结论，建议高度重视开展人工繁育与资源保护工作；大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷（"宫血宁"有效成分），独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷（"抗病毒颗粒"消炎、抗菌、抗病毒有效成分），可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.

English Abstract

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  • 大理重楼Paris daliensis H. Li et V.G. Souku和独龙重楼Paris dulongensis H. Li et S. Kuritap隶属百合科Liliacceae重楼属Paris，二者均没有国家和地方药材标准，根茎在云南、贵州等各地民间也作为重楼药材使用.重楼类药材质量控制均按照《中国药典》2015年版重楼皂苷含量评价；重楼皂苷中的甾体皂苷分布最为广泛、种类繁多，目前已分离出141种，约占已鉴定化合物种类的58.5%[1-11].目前关于大理重楼和独龙重楼的报道很少，因此，课题组采用实地调研考察，并根据《中国药典》2015年版重楼项下3种重楼皂苷，增加重楼皂苷Ⅰ、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷H为指标，以课题组已经建立的ELSD-UPLC法评价大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分，以期为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.

1.   材料与方法

    1.1.   仪器

  • 数码相机(佳能EOS-1D X Mark Ⅱ)；挖掘工具(铁铲、斧头等)；GPS(GT07). METTLER AE240电子分析天平(上海梅特勒-托利多仪器有限公司)；Waters Acquity UPLC© H-Class.

    • 1.2.   材料与试剂

  • 水(屈臣氏蒸馏水)；甲醇(成都市科龙化工试剂厂分析纯)；HPLC级乙腈(美国Sigma公司).化合物来源为本课题组已建立的方法[12-13]，7个对照品化学结构式见图 1.

    大理重楼和独龙重楼原植物由课题组鉴定，原植物标本及药材样品保存在西南民族大学青藏高原研究院、四川大学华西药学院.大理重楼和独龙重楼药材来源信息见表 1.

    • 1.3.   方法

    1.3.1.   大理重楼和独龙重楼的野生资源分布考察

  • 文献资料查阅：查阅云南、四川、贵州、福建、湖南、湖北等地的重楼主产区有关重楼属植物分类、生态环境分布的相关资料和文献，同时查阅重楼属植物标本馆藏丰富的西南地区各主要标本馆(室)的馆藏标本，并参考中国著名重楼专家李恒老师在《重楼属植物》中提出的重楼植物形态分类系统，初步掌握了独龙重楼和大理重楼的资源现状，并在此基础上制定和调整考察计划.

    实地考察：2006-2016年，课题组先后多次开展了对云贵川三省重楼主产区的资源调查和品种整理工作.重楼花期是每年4-7月，期间课题组对主产区进行野外实地考察、采集大量标本、走访调查以及后期查阅文献和相关资料，基本摸清了大理重楼的资源分布、蕴藏量及人工抚育情况，将云贵川的重楼属植物分布情况作为重点考察区域.本文的调查主要是2015-2016年在云南地区的大理重楼和独龙重楼重楼的资源调查.

    本调查地区基本沿怒江自然流域、独龙江自然流域以及高黎贡山一线，行政区划上分属云南的昆明市、禄劝县、贡山独龙族怒族自治县、武定县、元谋县、云南大理自治州、丽江地区、宁蒗县、腾冲市、龙陵县以及盐津县.该片地区北连青藏高原，南接中印半岛，呈南北走向，跨越5个纬度带，是我国最重要的生物保护区之一，物种繁多，极具特色.其中，课题主要考察品种大理重楼模式产地来自云南大理，独龙重楼的模式产地则来自怒江州独龙江乡.

    • 1.3.2.   大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分评价

  • 色谱条件：色谱柱和检测器参数见表 2，梯度洗脱程序见表 3，混合对照品、样品见图 2-图 4.

    对照品溶液的制备、供试品溶液的制备按照课题组已经建立的方法[12-13].

2.   结果与分析

    2.1.   大理重楼和独龙重楼的野生资源分布考察

  • 大理重楼除模式产地云南大理，在保山市腾冲市和贵州赫章县也发现了大理重楼的新分布，野生资源蕴藏量较少；独龙重楼只发现分布在云南省怒江州贡山县独龙江乡，野生资源蕴藏量更少；二者尚未被《中国药典》2015年版收载或者在各省级药材标准中，但是其根茎在云南、贵州等各地民间也在作为重楼药材使用.

    • 2.2.   大理重楼和独龙重楼中6种皂苷成分评价

  • 按照课题组已经建立的方法[12-13]，测定和计算样品中重楼皂苷含量，大理重楼皂苷含量结果见表 4，独龙重楼皂苷含量结果见表 5.其大理重楼色谱图见图 5，独龙重楼色谱图见图 6.

    10批大理重楼根茎皂苷类成分总含量平均值高于药典规定标准1倍多，主要含有重楼皂苷Ⅶ和重楼皂苷H；在仅采集到的7批独龙重楼皂苷类成分总含量平均值达到药典规定标准，主要含有重楼皂苷Ⅰ和纤细偏诺皂苷.

3.   结论与讨论

  • 大理重楼除了模式重楼大理外，发现在高黎贡山、腾冲市和贵州省赫章县有野生资源.大理重楼和独龙重楼野生资源濒危，建议开展人工栽培和加大保护力度，并作为种质资源予以保存.大理重楼根茎主要成分为偏诺皂苷[14](“宫血宁”有效成分)，独龙重楼根茎主要成分为薯蓣皂苷(“抗病毒颗粒”消炎、抗菌、抗病毒有效成分)，可为大理重楼和独龙重楼的省级药材标准建立和临床用药新药资源开发提供参考依据.

参考文献 (14)

目录

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