山羊精子介导转染外源DNA的研究

赵永聚,郑双艳

西南大学学报（自然科学版）

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山羊精子介导转染外源DNA的研究

赵永聚,郑双艳. 山羊精子介导转染外源DNA的研究[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(6).

引用本文:

赵永聚,郑双艳. 山羊精子介导转染外源DNA的研究[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(6).

Study on Goat Sperm-Mediated Foreign DNA Transfection[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(6).

Citation:

Study on Goat Sperm-Mediated Foreign DNA Transfection[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(6).

山羊精子介导转染外源DNA的研究

赵永聚,郑双艳

西南大学,动物科技学院,重庆,400716

Study on Goat Sperm-Mediated Foreign DNA Transfection

摘要: 目的:建立山羊精子介导转染外源DNA的方法,并探索精液离心与否与添加异种精清对转染效率的影响.方法:将采集的山羊精液经过离心处理与标记的线形化pEGFP-N1质粒共育转染,分别用免疫组化的方法检测转染效率、PCR和Southern blotting检测转染外源DNA在精子的结合部位和结合率;同时将实验分为3组,分别为鲜精直接转染、离心后转染和离心山羊精液添加猪精清转染,用免疫组化方法检测转染外源DNA效率.结果:精子核后帽区是结合转染外源DNA的主要部位;3种处理的阳性转染率分别为(26.19±3.25)，、(62.04±7.87)，和(17.04±9.34)，;DNaseⅠ消化后的阳性转染率分别为(11.50±5.05)，、(34.00±5.87)，和(10.00±4.24)，.离心组与未离心组和添加猪精清组差异极显著(p＜0.01).结论:山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力;羊精清和异种精清明显降低精子结合外源基因的效率.
- 山羊,精子,外源DNA,转染,精清

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山羊精子介导转染外源DNA的研究

赵永聚,郑双艳

西南大学,动物科技学院,重庆,400716

关键词:

山羊,精子,外源DNA,转染,精清

摘要: 目的:建立山羊精子介导转染外源DNA的方法,并探索精液离心与否与添加异种精清对转染效率的影响.方法:将采集的山羊精液经过离心处理与标记的线形化pEGFP-N1质粒共育转染,分别用免疫组化的方法检测转染效率、PCR和Southern blotting检测转染外源DNA在精子的结合部位和结合率;同时将实验分为3组,分别为鲜精直接转染、离心后转染和离心山羊精液添加猪精清转染,用免疫组化方法检测转染外源DNA效率.结果:精子核后帽区是结合转染外源DNA的主要部位;3种处理的阳性转染率分别为(26.19±3.25)，、(62.04±7.87)，和(17.04±9.34)，;DNaseⅠ消化后的阳性转染率分别为(11.50±5.05)，、(34.00±5.87)，和(10.00±4.24)，.离心组与未离心组和添加猪精清组差异极显著(p＜0.01).结论:山羊精子具有自发性结合外源DNA的能力;羊精清和异种精清明显降低精子结合外源基因的效率.