野百合AFLP反应体系的建立及优化

柯贤锋,智丽,眭顺照,秦华,李名扬,李先源

西南大学学报（自然科学版）

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野百合AFLP反应体系的建立及优化

柯贤锋,智丽,眭顺照,秦华,李名扬,李先源. 野百合AFLP反应体系的建立及优化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(12).

引用本文:

柯贤锋,智丽,眭顺照,秦华,李名扬,李先源. 野百合AFLP反应体系的建立及优化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(12).

Establishment and Optimization of an AFLP Reaction System for Lilium brownii[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(12).

Citation:

Establishment and Optimization of an AFLP Reaction System for Lilium brownii[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(12).

野百合AFLP反应体系的建立及优化

柯贤锋,智丽,眭顺照,秦华,李名扬,李先源

西南大学,园艺园林学院,重庆,400716,西南大学,花卉研究所,重庆,400716

Establishment and Optimization of an AFLP Reaction System for Lilium brownii

摘要: 以重庆市巫山和巫溪两地的野百合为实验材料, 对实验中涉及的各个重要试剂, 如接头浓度、预扩和选扩模板稀释倍数及dNTP等的用量进行梯度比较, 确定最佳用量. 结果表明: ①改良的CTAB法提取的野百合基因组DNA经过纯化后符合AFLP实验要求; ②接头浓度为50 pmol/μL 较好; ③酶切连接产物稀释20倍, dNTP用量为1.0 μL(50 μL体系), 72 ℃开始扩增较好; ④预扩增产物稀释30倍最佳. ⑤从64个引物组合中筛选出符合野百合AFLP反应的20对引物组合. 因此, 优化后的体系适合野百合遗传多样性研究.
- 野百合,AFLP,体系优化

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野百合AFLP反应体系的建立及优化

柯贤锋,智丽,眭顺照,秦华,李名扬,李先源

西南大学,园艺园林学院,重庆,400716,西南大学,花卉研究所,重庆,400716

关键词:

野百合,AFLP,体系优化

摘要: 以重庆市巫山和巫溪两地的野百合为实验材料, 对实验中涉及的各个重要试剂, 如接头浓度、预扩和选扩模板稀释倍数及dNTP等的用量进行梯度比较, 确定最佳用量. 结果表明: ①改良的CTAB法提取的野百合基因组DNA经过纯化后符合AFLP实验要求; ②接头浓度为50 pmol/μL 较好; ③酶切连接产物稀释20倍, dNTP用量为1.0 μL(50 μL体系), 72 ℃开始扩增较好; ④预扩增产物稀释30倍最佳. ⑤从64个引物组合中筛选出符合野百合AFLP反应的20对引物组合. 因此, 优化后的体系适合野百合遗传多样性研究.