毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化

易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰

西南大学学报（自然科学版）

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毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化

易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰. 毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(1).

引用本文:

易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰. 毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(1).

Optimization of Conditions to Stabilize and Maximize Pichia pastoris Fermentation of Recombinant Mutant Interleukin-2[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(1).

Citation:

Optimization of Conditions to Stabilize and Maximize Pichia pastoris Fermentation of Recombinant Mutant Interleukin-2[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(1).

毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化

易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰

西南大学,生命科学学院,重庆,400715

Optimization of Conditions to Stabilize and Maximize Pichia pastoris Fermentation of Recombinant Mutant Interleukin-2

摘要: 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala; 18leu→Met; 19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM71/pPIC9K-IL-2的生长及产物表达规律,通过3因素(即:发酵液起始pH值、甲醇诱导浓度、诱导时间)从3个不同水平上进行正交试验,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得出摇瓶发酵表达MvhIL-2的最佳条件:发酵液初始pH 6.0,甲醇诱导浓度为0.5，,诱导72 h,最终使目的产物达到菌体总蛋白的30，以上,表达的MvhIL-2考马斯亮蓝染色条带最明显,为其进一步上发酵罐,大量生产重组人白细胞介素-2奠定了基础.
- 毕赤酵母,人白细胞介素-2突变体,正交试验

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毕赤酵母工程菌表达人白细胞介素-2突变体发酵条件的优化

易巧,宋小双,朱祥伟,刘堰

西南大学,生命科学学院,重庆,400715

关键词:

毕赤酵母,人白细胞介素-2突变体,正交试验

摘要: 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)工程菌(KM71/pPIC9K-MvhIL-2,本室构建)能分泌表达三突变体人白细胞介素-2(MvhIL-2),突变位点分别为125 Cys→Ala; 18leu→Met; 19leu→Ser.通过对其发酵条件的研究,探索重组人白细胞介素-2突变体工程菌KM71/pPIC9K-IL-2的生长及产物表达规律,通过3因素(即:发酵液起始pH值、甲醇诱导浓度、诱导时间)从3个不同水平上进行正交试验,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,得出摇瓶发酵表达MvhIL-2的最佳条件:发酵液初始pH 6.0,甲醇诱导浓度为0.5，,诱导72 h,最终使目的产物达到菌体总蛋白的30，以上,表达的MvhIL-2考马斯亮蓝染色条带最明显,为其进一步上发酵罐,大量生产重组人白细胞介素-2奠定了基础.