产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

武文明,曾昭淳,李小彦,杨小兰,廖飞

西南大学学报（自然科学版）

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产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

武文明,曾昭淳,李小彦,杨小兰,廖飞. 产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(3).

引用本文:

武文明,曾昭淳,李小彦,杨小兰,廖飞. 产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(3).

Purification and Characterization of the Uricase from Candida utilis[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(3).

Citation:

Purification and Characterization of the Uricase from Candida utilis[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(3).

产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

武文明,曾昭淳,李小彦,杨小兰,廖飞

重庆医科大学,药学院,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,基础医学院,生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016,重庆医科大学,药学院,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆,400016

Purification and Characterization of the Uricase from Candida utilis

摘要: 产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50，以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90，以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.
- 产朊假丝酵母,尿酸酶,高尿酸血症

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产朊假丝酵母尿酸酶的纯化和特性研究

武文明,曾昭淳,李小彦,杨小兰,廖飞

重庆医科大学,药学院,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,基础医学院,生物化学与分子生物学教研室,重庆,400016,重庆医科大学,药学院,重庆市生物化学与分子药理学重点实验室,重庆,400016

关键词:

产朊假丝酵母,尿酸酶,高尿酸血症

摘要: 产朊假丝酵母尿酸酶经2次DEAE-cellulose 52层析后比活性提高20倍以上, SDS-PAGE分析发现其含一种约33.0 kD多肽, Sephadex G-200层析发现此天然尿酸酶分子量约134.0 kD. MALDI-TOF-MS分析比活性＞7.0 U/mg样品没有检测到单一肽链, 而丰度最高成分为67.7 kD, 次高成分为131.4 kD. 此酶最适pH值接近8.8, 在pH 7.4时可保留50，以上活性, 37 ℃时4 h内稳定, 米氏常数为(32.8±3.1)μmol/L(n=10), 黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);用蒸馏水透析后失活90，以上, 且随后加NaCl处理后酶活性不能恢复. Cu2+ 和Fe3+在1.0 mmol/L时对此酶有明显抑制作用. 这些结果表明此尿酸酶需通过分子工程改造才能用作治疗高尿酸血症相关疾病的药物.