大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建

孙现超,薛杨,安德荣,青玲,杨水英

西南大学学报（自然科学版）

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大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建

孙现超,薛杨,安德荣,青玲,杨水英. 大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(4).

引用本文:

孙现超,薛杨,安德荣,青玲,杨水英. 大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(4).

Construction of the cDNA Library of Barley Infected by the Barley Stripe Mosaic Virus[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(4).

Citation:

Construction of the cDNA Library of Barley Infected by the Barley Stripe Mosaic Virus[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(4).

大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建

孙现超,薛杨,安德荣,青玲,杨水英

西南大学,植物保护学院,重庆,400716,中国农业科学院,柑橘研究所,重庆,400716,西北农林科技大学,植物保护学院,陕西,杨凌,712100

Construction of the cDNA Library of Barley Infected by the Barley Stripe Mosaic Virus

摘要: 构建病毒诱导的寄主植物cDNA文库是利用酵母双杂交方法筛选与病毒相互作用寄主因子的前提奈件.该文以大麦条纹花叶病毒接种大麦,在ELISA跟踪检测的病毒复制和运动初期,采集大麦叶片,用TRIZOL法提取总RNA,利用SMART原理进行反转录PCR获得dscDNA,Sfi I/Xho I共切后1.1，琼脂糖凝胶检测并分段回收dscDNA,分别与Sfi I/Xho I共切的载体连接后,共同转化X-blue感受态细胞构建文库.文库的容量和质量检测结果表明:文库的容量为1.27×106,插入片段大于500 bp,集中在1.2 kb左右,符合酵母双杂交筛选文库的要求.
- 大麦条纹花叶病毒,诱导,构建,cDNA文库

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大麦条纹花叶病毒诱导大麦cDNA文库的构建

孙现超,薛杨,安德荣,青玲,杨水英

西南大学,植物保护学院,重庆,400716,中国农业科学院,柑橘研究所,重庆,400716,西北农林科技大学,植物保护学院,陕西,杨凌,712100

关键词:

大麦条纹花叶病毒,诱导,构建,cDNA文库

摘要: 构建病毒诱导的寄主植物cDNA文库是利用酵母双杂交方法筛选与病毒相互作用寄主因子的前提奈件.该文以大麦条纹花叶病毒接种大麦,在ELISA跟踪检测的病毒复制和运动初期,采集大麦叶片,用TRIZOL法提取总RNA,利用SMART原理进行反转录PCR获得dscDNA,Sfi I/Xho I共切后1.1，琼脂糖凝胶检测并分段回收dscDNA,分别与Sfi I/Xho I共切的载体连接后,共同转化X-blue感受态细胞构建文库.文库的容量和质量检测结果表明:文库的容量为1.27×106,插入片段大于500 bp,集中在1.2 kb左右,符合酵母双杂交筛选文库的要求.