甘蓝THL1真核表达载体构建及其蛋白质结构预测
Construction of Eukaryotic Expression Vector of THL1 and Prediction of Its Protein Structure
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摘要: THL1是参与甘蓝自交不亲和性信号传导的重要调控因子之一.实验从"E"甘蓝柱头组织中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增THL1编码序列,将其末端加"A"后与pMD18-T栽体连接,转化E.coli DH5a.选阳性克隆提取质粒,经EcoR Ⅰ/Not Ⅰ双酶切后,将目的片段亚克隆至真核表达载体pPIC9K,再转化至E.coli DH5a.经茵落PCR鉴定、酶切鉴定和生物信息学分析表明,THL1正确插入了载体pPIC9K.首次成功构建了真核表达载体pPIC9K-THL1,并进行了THL1蛋白质结构预测,这为深入研究THL1在甘蓝自交不亲和性信号传导中的作用奠定了基础.
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