环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达

罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏

西南大学学报（自然科学版）

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环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达

罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏. 环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(10).

引用本文:

罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏. 环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(10).

The Construction of COX-2 DNA Vaccine and Its Expression in COS-7 Cells[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(10).

Citation:

The Construction of COX-2 DNA Vaccine and Its Expression in COS-7 Cells[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(10).

环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达

罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏

同济大学,附属上海市肺科医院药剂科,上海,200433,同济大学,附属上海市肺科医院肺癌免疫研究室,上海,200433,西南大学,生命科学学院,重庆,400715

The Construction of COX-2 DNA Vaccine and Its Expression in COS-7 Cells

摘要: 构建了环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2, COX-2)的DNA疫苗载体pVAX1-COX-2, 并考察在COS-7细胞中表达. 用RT-PCR法从肺癌A549细胞中获得环氧合酶-2基因片段, 此片段插入pVAX1载体构建pVAX1-COX-2真核重组表达质粒, 脂质体介导法转染COS-7细胞, 以pVAX1为对照, 收集稳定转染细胞, 利用RT-PCR和Western-blot分别在mRNA和蛋白水平上考察COX-2表达. 实验结果表明: RT-PCR法从A549细胞mRNA中扩增1.8 kb的COX-2基因片段, 酶切与测序结果表明所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2与预期相符, 质脂体法成功地将质粒DNA转染到COS-7细胞中. RT-PCR和Western-blot分析结果表明COX-2已表达. 因此, 所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2正确, 且在COS-7细胞中表达.
- 环氧合酶-2,DNA疫苗,真核表达,COS-7细胞株

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环氧合酶-2的DNA疫苗构建及其在COS-7细胞中表达

罗恒,王和勇,向阳,唐亮,谈立松,周彩存,孙敏

同济大学,附属上海市肺科医院药剂科,上海,200433,同济大学,附属上海市肺科医院肺癌免疫研究室,上海,200433,西南大学,生命科学学院,重庆,400715

关键词:

环氧合酶-2,DNA疫苗,真核表达,COS-7细胞株

摘要: 构建了环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2, COX-2)的DNA疫苗载体pVAX1-COX-2, 并考察在COS-7细胞中表达. 用RT-PCR法从肺癌A549细胞中获得环氧合酶-2基因片段, 此片段插入pVAX1载体构建pVAX1-COX-2真核重组表达质粒, 脂质体介导法转染COS-7细胞, 以pVAX1为对照, 收集稳定转染细胞, 利用RT-PCR和Western-blot分别在mRNA和蛋白水平上考察COX-2表达. 实验结果表明: RT-PCR法从A549细胞mRNA中扩增1.8 kb的COX-2基因片段, 酶切与测序结果表明所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2与预期相符, 质脂体法成功地将质粒DNA转染到COS-7细胞中. RT-PCR和Western-blot分析结果表明COX-2已表达. 因此, 所构建的真核表达载体pVAX1-COX-2正确, 且在COS-7细胞中表达.