环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化

向阳,王和勇,雷桅,孙敏

西南大学学报（自然科学版）

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环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化

向阳,王和勇,雷桅,孙敏. 环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(12).

引用本文:

向阳,王和勇,雷桅,孙敏. 环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2008, 30(12).

The Expression and Purification of COX-2 in Escherichia coli[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(12).

Citation:

The Expression and Purification of COX-2 in Escherichia coli[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2008, 30(12).

环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化

向阳,王和勇,雷桅,孙敏

西南大学生命科学学院,重庆,400715;三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715,同济大学附属上海市肺科医院,上海,200433

The Expression and Purification of COX-2 in Escherichia coli

摘要: 通过RT-PCR从肺癌细胞株A549克隆环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)基因全长1.8 kb,测序结果与已发表的一致;将该片段插入pET32-a(+)裁体中,构建原核表达栽体pET-32-COX-2,转入BL-21中,IPTG诱导重组融合蛋白his-COX-2表达,SDS-PAGE分析71kD处有特异条带,与理论相符;Western blotting验证为COX-2蛋白;用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化融合蛋白,获得纯度较高的原核表达蛋白.为其新型抑制剂的研发与抗肿瘤作用蛋白疫苗的研制奠定基础.
- COX-2,融合蛋白,原核表达、纯化

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环加氧酶2基因的大肠杆菌表达与纯化

向阳,王和勇,雷桅,孙敏

西南大学生命科学学院,重庆,400715;三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆,400715,同济大学附属上海市肺科医院,上海,200433

关键词:

COX-2,融合蛋白,原核表达、纯化

摘要: 通过RT-PCR从肺癌细胞株A549克隆环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX-2)基因全长1.8 kb,测序结果与已发表的一致;将该片段插入pET32-a(+)裁体中,构建原核表达栽体pET-32-COX-2,转入BL-21中,IPTG诱导重组融合蛋白his-COX-2表达,SDS-PAGE分析71kD处有特异条带,与理论相符;Western blotting验证为COX-2蛋白;用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化融合蛋白,获得纯度较高的原核表达蛋白.为其新型抑制剂的研发与抗肿瘤作用蛋白疫苗的研制奠定基础.