人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定

宋小双,聂盼,马永鹏,刘堰

西南大学学报（自然科学版）

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
	姓名不能为空！
邮箱
	邮箱不能为空！非法的邮箱地址。
手机号码
	电话不能为空！请输入有效手机号!
标题
	标题不能为空！
留言内容
	内容不能为空！
验证码
	验证码不能为空！验证码错误！

人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定

宋小双,聂盼,马永鹏,刘堰. 人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2009, 31(8).

引用本文:

宋小双,聂盼,马永鹏,刘堰. 人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2009, 31(8).

Cloning and Expression of hIL-2 Mutants in E.coli and Its Identification[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2009, 31(8).

Citation:

Cloning and Expression of hIL-2 Mutants in E.coli and Its Identification[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2009, 31(8).

人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定

宋小双,聂盼,马永鹏,刘堰

西南大学生命科学学院,重庆,400715

Cloning and Expression of hIL-2 Mutants in E.coli and Its Identification

摘要: 根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoR I和BamHI对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切坚定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15 kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.
- 大肠杆菌表达系统,白细胞介素-2突变体,克隆,表达载体pBV220

计量

文章访问数: 322
HTML全文浏览数: 109
PDF下载数: 0
施引文献: 0

人白细胞介素-2突变体在大肠杆菌中的克隆表达与鉴定

宋小双,聂盼,马永鹏,刘堰

西南大学生命科学学院,重庆,400715

关键词:

大肠杆菌表达系统,白细胞介素-2突变体,克隆,表达载体pBV220

摘要: 根据GenBank报道的人白细胞介素-2(hIL-2)基因分析设计并合成引物,以本室构建的pPIC9K/IL-2突变体(编码125位半胱氨酸→丙氨酸、18位亮氨酸→蛋氨酸、19位亮氨酸→丝氨酸)为模板,PCR扩增出突变型人白细胞介素-2基因.用EcoR I和BamHI对目的基因进行双酶切后,插入大肠杆菌表达载体pBV220,转化宿主菌JM109,经菌落PCR筛选阳性重组子、酶切坚定,DNA序列分析证实,重组质粒pBV220/IL-2含有突变型人IL-2编码序列及正确的开放阅读框.经42℃热诱导表达,SDS-PAGE电泳显示,诱导表达碎菌后的沉淀中有分子质量大小约为15 kD的外源蛋白产生,经Western印迹证明为rhIL-2.成功建立了突变型人白细胞介素-2(rhIL-2)基因的大肠杆菌表达系统,为rhIL-2的生产及临床应用奠定基础.