高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定

霍金柱,陈斌,李莹,何正波,敬俊锋

西南大学学报（自然科学版）

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高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定

霍金柱,陈斌,李莹,何正波,敬俊锋. 高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2011, 33(6).

引用本文:

霍金柱,陈斌,李莹,何正波,敬俊锋. 高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2011, 33(6).

Screening and Determination of a Fibrinolytic Enzyme-Producing Strain of Bacillus subtilis and Its Activity Assay[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2011, 33(6).

Citation:

Screening and Determination of a Fibrinolytic Enzyme-Producing Strain of Bacillus subtilis and Its Activity Assay[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2011, 33(6).

高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定

霍金柱,陈斌,李莹,何正波,敬俊锋

重庆师范大学昆虫与分子生物学研究所,重庆400047;重庆高校生物活性物质工程研究中心,重庆400047;活性物质生物技术教育部工程研究中心,重庆400047

Screening and Determination of a Fibrinolytic Enzyme-Producing Strain of Bacillus subtilis and Its Activity Assay

摘要: 以日本纳豆、重庆江津豆豉、忠县豆腐乳为原料,采用酪蛋白平板初筛、摇瓶复筛,得到18株产溶栓酶的菌株.通过纤维蛋白平板实验,从忠县豆腐乳中筛选出1株具有较高溶栓活性的菌株FR-033(登录号:HQ009804),菌株经液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵分段盐析及sephadexG-50凝胶层析进行纯化,获得较高纯度的溶栓酶,酶活力为2 163 IU/mL.进一步对FR-033菌株的形态和生理生化特征进行研究.利用细菌16S rDNA通用引物对16S rRNA进行PCR扩增并测序,得到1 444 bp长度的DNA序列,通过BLAST软件在NCBI网站收索其同源性性序列,利用PAUP4.0和MAGE4软件绘制系统发育树,结果表明:菌株FR-033与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的16S rRNA序列同源性达99，以上,在系统发育树中,菌株FR-033与枯草芽孢杆菌在同一支上,且遗传距离最短;FR-033的形态及大部分生理生化特征与枯草芽孢杆菌极为相似,表明该菌株是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的一个高效的产溶栓酶菌株.
- 豆腐乳,枯草芽孢杆菌,活性测定,16SrRNA

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高效溶栓菌株的筛选鉴定及活性测定

霍金柱,陈斌,李莹,何正波,敬俊锋

重庆师范大学昆虫与分子生物学研究所,重庆400047;重庆高校生物活性物质工程研究中心,重庆400047;活性物质生物技术教育部工程研究中心,重庆400047

关键词:

豆腐乳,枯草芽孢杆菌,活性测定,16SrRNA

摘要: 以日本纳豆、重庆江津豆豉、忠县豆腐乳为原料,采用酪蛋白平板初筛、摇瓶复筛,得到18株产溶栓酶的菌株.通过纤维蛋白平板实验,从忠县豆腐乳中筛选出1株具有较高溶栓活性的菌株FR-033(登录号:HQ009804),菌株经液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵分段盐析及sephadexG-50凝胶层析进行纯化,获得较高纯度的溶栓酶,酶活力为2 163 IU/mL.进一步对FR-033菌株的形态和生理生化特征进行研究.利用细菌16S rDNA通用引物对16S rRNA进行PCR扩增并测序,得到1 444 bp长度的DNA序列,通过BLAST软件在NCBI网站收索其同源性性序列,利用PAUP4.0和MAGE4软件绘制系统发育树,结果表明:菌株FR-033与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的16S rRNA序列同源性达99，以上,在系统发育树中,菌株FR-033与枯草芽孢杆菌在同一支上,且遗传距离最短;FR-033的形态及大部分生理生化特征与枯草芽孢杆菌极为相似,表明该菌株是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的一个高效的产溶栓酶菌株.