山羊C D 4基因的克隆及组织表达分析
- 南昌大学 实验动物科学部,南昌3 3 0 0 3 1;西南大学 动物科技学院,重庆4 0 0 7 1 6;江西农业大学 动物科学技术学院,南昌3 3 0 0 4 5;西南大学 生命科学学院,重庆4 0 0 7 1 6
摘要: C D 4基因是质膜上的转运系统之一,为动物辅助性T细胞( TH) 和部分胸腺细胞的共受体与信号传导分子,参与T C R介 导 的TH细 胞 活 化 和 胸 腺 细 胞 分 化 过 程.该 研 究 首 次 克 隆 了 山 羊C D 4基 因 (G e n B a n k登 录 号:E U 9 1 3 0 9 3) ,并分析了该基因的组织表达情况.结果表明:所克隆的山羊C D 4全长c D NA序列为15 5 5b p,开放阅读框( O R F) 为13 6 8b p,编码4 5 5个氨基酸的蛋白,相对分子质量为5 . 0 5×1 04,等电点为9 . 5 2.山羊C D 4蛋白前体由信号肽、胞外区、跨膜区和胞浆区4个部分构成.胞外区含有4个I g样结构域,2个二硫键( C4 1—C1 0 9和C1 4 3—C1 8 0) 及3个N糖基化位点(N2 3 1,N2 6 3和N3 4 3).氨基酸序列比对表明山羊C D 4与绵羊C D 4的氨基酸相似性为9 8%,与猪、人、兔、狗、猫、蝙蝠以及小鼠的氨基酸相似性分别为8 1%, 7 4%, 7 3%, 7 2%, 7 0%, 7 0%和6 6%.系统发育树表明山羊C D 4与绵羊和猪的C D 4蛋白聚成一支,表明它们有较近的亲缘关系,其中山羊与绵羊的亲缘关系最近,而与狗、蝙蝠、兔、人和小鼠的亲缘关系相对较远.实时荧光定量P C R分析发现,C D 4在山羊淋巴中的表达量最高,在睾丸中表达量较低,表明山羊C D 4是一种免疫分子.