农杆菌介导转化油菜中几种影响玻璃化频率的因素
So m eF a c t o r sA f f e c t i n gV i t r i f i c a t i o n i nB r a s s i c an a p u sT r a n s f o r m a t i o nM e d i a t e db yA g r o b a c t e r i u mt u m e f a c i e n s
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摘要: 在用农杆菌介导法转化甘蓝型油菜的组织培养过程中,常会伴生着试管苗玻璃化现象的发生,此现象的发生会降低转基因的频率.本试验结果表明,影响玻璃化发生的因素较多,包括激素体积质量分数、蔗糖体积质量分数、琼脂体积质量分数和接种密度等.其中,激素6 - B A和Z T体积质量分数对诱芽率和玻璃化率都有显著影响,随着体积质量分数的升高,玻璃化率升高,以6 - B A体积质量分数为1m g/L,Z T体积质量分数为2m g/L时结果较为理想.蔗糖体积质量分数和琼脂体积质量分数对玻璃化率也有显著影响,当二者体积质量分数升高,玻璃化率降低,同时诱芽率也降低.综合分析,当蔗糖体积质量分数为5 0g/L,琼脂体积质量分数为1 0g/L时最适宜.接种密度对玻璃化的发生有显著影响,密度越高,玻璃化倾向越严重,而密度对诱芽率影响不明显.试验结果分析发现,接种密度为2 0~3 0个/皿最适宜.
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