引用本文:向廷秀,谯敏,姜政,陶小红,黄爱龙,王丕龙.共表达EGFP和UreB活载体疫苗的体内外稳定性研究[J].西南大学学报(自然科学版),2006,28(6):1011~1015
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共表达EGFP和UreB活载体疫苗的体内外稳定性研究
向廷秀,谯敏,姜政,陶小红,黄爱龙,王丕龙
作者单位
摘要:
建立共表达人幽门螺杆菌UreB和绿色荧光蛋白的重组耻垢分枝杆菌疫苗株,为进一步应用重组耻垢分枝杆菌疫苗防治幽门螺杆菌感染打下基础.利用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增的幽门螺杆菌的尿素酶编码基因全长片段,克隆入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒pLA 73,构建pLA 73-UreB载体,将pLA 73-UreB和pEGFP共转化耻垢分枝杆菌,经卡那霉素和氨苄青霉素双筛选后,抽提质粒用PCR法鉴定,Westernblot检测UreB的表达及活性.液体培养菌液在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光.从幽门螺杆菌基因组中扩增出约1 710 bp的基因片段,所构建重组体阳性克隆经酶切和PCR鉴定与预期结果一致,测序结果确证了插入片段的正确性,Western blot检测说明幽门螺杆菌的UreB编码基因在分枝杆菌中获得了表达并具有良好的免疫原性.成功构建了共表达EGFP和幽门螺杆菌UreB基因的耻垢分枝杆菌疫苗,为其在幽门螺杆菌的防治中的应用奠定了研究基础.
关键词:  绿色荧光蛋白、幽门螺杆菌、疫苗、耻垢分枝杆菌
DOI:
分类号:R735.2
基金项目:2004年国家自然科学基金资助项目(30371318)
ESTABLISHMENT OF MYCOBACTERIUM SMEGMATIS VACCINE CO- EXPRESSING HELICOBACTER PYLORI UreB AND GREEN FLUORESCENT PROTEIN
XIANG Ting-xiu  QIAO Min  JIANG Zheng  TAO Xiao-hong  HUANG Ai-long  WANG Pi-long
Abstract:
Key words:  
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