油葵种子特异性基因HaAP10启动子克隆及功能验证

邵铁梅;仵陶;焦展;李雪;刘培;柴锡庆;安胜军;高维娟;

doi:10.13718/j.cnki.xsxb.2016.10.007

西南师范大学学报(自然科学版)

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油葵种子特异性基因HaAP10启动子克隆及功能验证

邵铁梅;仵陶;焦展;李雪;刘培;柴锡庆;安胜军;高维娟;. 油葵种子特异性基因HaAP10启动子克隆及功能验证[J]. 西南师范大学学报(自然科学版), 2016, 41(10): 39-45. doi: 10.13718/j.cnki.xsxb.2016.10.007

引用本文:

Citation:

油葵种子特异性基因HaAP10启动子克隆及功能验证

邵铁梅;仵陶;焦展;李雪;刘培;柴锡庆;安胜军;高维娟;

河北化工医药职业技术学院/河北省高校生物反应器与蛋白类药物应用技术研发中心; 河北中医学院;

摘要: 为研究植物脂质转移蛋白基因HaAP10启动子能否在油葵种子中驱动外源基因特异性表达,从油葵(Helianthus annuus L.)基因组DNA中采用PCR技术克隆了HaAP10基因上游的调控序列964bp.序列分析结果表明,964bp核苷酸序列与报道序列同源性99%,包含TATA-box等基因表达的重要特征元件及种子特异表达所必需的核苷酸序列.将其与β-葡糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因融合构建植物表达载体,并利用花粉管通道法转化油葵获得转基因植株,通过PCR鉴定和组织化学染色进行分析.PCR扩增初步证明目的片段已整合到油葵基因组中,组织化学分析表明HaAP10基因启动子能够驱动GUS基因在种子中特异表达,而在根、茎和叶中无GUS活性.结果表明HaAP10基因上游964bp片段可驱动外源基因在油葵种子中特异性表达,具有种子特异性启动子的功能,为油葵植物生物反应器的构建提供了优良的基因资源,同时也为油葵的油脂基因工程改良提供了基因资源.
- 油葵 /
- 种子特异性启动子 /
- GUS染色

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油葵种子特异性基因HaAP10启动子克隆及功能验证

邵铁梅;仵陶;焦展;李雪;刘培;柴锡庆;安胜军;高维娟;

河北化工医药职业技术学院/河北省高校生物反应器与蛋白类药物应用技术研发中心; 河北中医学院;

关键词:

摘要: 为研究植物脂质转移蛋白基因HaAP10启动子能否在油葵种子中驱动外源基因特异性表达,从油葵(Helianthus annuus L.)基因组DNA中采用PCR技术克隆了HaAP10基因上游的调控序列964bp.序列分析结果表明,964bp核苷酸序列与报道序列同源性99%,包含TATA-box等基因表达的重要特征元件及种子特异表达所必需的核苷酸序列.将其与β-葡糖苷酸酶(β-glucuronidase,GUS)基因融合构建植物表达载体,并利用花粉管通道法转化油葵获得转基因植株,通过PCR鉴定和组织化学染色进行分析.PCR扩增初步证明目的片段已整合到油葵基因组中,组织化学分析表明HaAP10基因启动子能够驱动GUS基因在种子中特异表达,而在根、茎和叶中无GUS活性.结果表明HaAP10基因上游964bp片段可驱动外源基因在油葵种子中特异性表达,具有种子特异性启动子的功能,为油葵植物生物反应器的构建提供了优良的基因资源,同时也为油葵的油脂基因工程改良提供了基因资源.