PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术

孙宪昀,王中康,周常勇,夏玉先

西南大学学报（自然科学版）

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PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术

孙宪昀,王中康,周常勇,夏玉先. PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2004, 26(2).

引用本文:

孙宪昀,王中康,周常勇,夏玉先. PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2004, 26(2).

A RAPID TECHNIQUE FOR SAMPLE PREPARATION FOR XANTHOMONAS AXONOPODIS PV.CITRI DETECTION WITH PCR[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2004, 26(2).

Citation:

A RAPID TECHNIQUE FOR SAMPLE PREPARATION FOR XANTHOMONAS AXONOPODIS PV.CITRI DETECTION WITH PCR[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2004, 26(2).

PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术

孙宪昀,王中康,周常勇,夏玉先

西南农业大学,植物保护学院,重庆,400716,重庆大学,基因工程研究中心,重庆,400030

A RAPID TECHNIQUE FOR SAMPLE PREPARATION FOR XANTHOMONAS AXONOPODIS PV.CITRI DETECTION WITH PCR

摘要: 采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试.4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10～15 min.浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异.对于无症柑桔样品,浸泡液中加入终浓度为0.3，的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和铜制剂残留的Cu2+等抑制PCR反应物质的干扰作用.样品浸提液经过离心处理,不仅可以有效浓缩靶细菌,提高检测灵敏度,而且可以除去PCR反应抑制物质,大大降低了检测的假阴性.
- 制样技术,浸泡,PCR,柑桔溃疡病

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PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术

孙宪昀,王中康,周常勇,夏玉先

西南农业大学,植物保护学院,重庆,400716,重庆大学,基因工程研究中心,重庆,400030

关键词:

制样技术,浸泡,PCR,柑桔溃疡病

摘要: 采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试.4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10～15 min.浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异.对于无症柑桔样品,浸泡液中加入终浓度为0.3，的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和铜制剂残留的Cu2+等抑制PCR反应物质的干扰作用.样品浸提液经过离心处理,不仅可以有效浓缩靶细菌,提高检测灵敏度,而且可以除去PCR反应抑制物质,大大降低了检测的假阴性.