小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

陈妮,左国伟,潘玥,赖国旗,杨根岭,向延秀,韩建红,黄云

西南大学学报（自然科学版）

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
	姓名不能为空！
邮箱
	邮箱不能为空！非法的邮箱地址。
手机号码
	电话不能为空！请输入有效手机号!
标题
	标题不能为空！
留言内容
	内容不能为空！
验证码
	验证码不能为空！验证码错误！

小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

陈妮,左国伟,潘玥,赖国旗,杨根岭,向延秀,韩建红,黄云. 小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2011, 33(8).

引用本文:

陈妮,左国伟,潘玥,赖国旗,杨根岭,向延秀,韩建红,黄云. 小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2011, 33(8).

Construction and Identification of a siRNA Recombinant Adenovirus Vector for Mouse Chromodomain Helicase DNA Binding Domain 5 Gene[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2011, 33(8).

Citation:

Construction and Identification of a siRNA Recombinant Adenovirus Vector for Mouse Chromodomain Helicase DNA Binding Domain 5 Gene[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2011, 33(8).

小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

陈妮,左国伟,潘玥,赖国旗,杨根岭,向延秀,韩建红,黄云

重庆医科大学实验动物中心,重庆,400016,重庆医科大学医学检验系,重庆,400016,重庆医科大学实验动物中心,重庆400016/重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学实验室,重庆,400016,泸州医学院实验动物科,四川泸州,646000,泸州市畜牧局,四川泸州,646000

Construction and Identification of a siRNA Recombinant Adenovirus Vector for Mouse Chromodomain Helicase DNA Binding Domain 5 Gene

摘要: 目的：构建小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白5（CHD5）基因干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）重组腺病毒载体并在NIH3T3细胞中验证其干扰作用.方法：人工合成靶向CHD5的siRNA干扰序列,用分子克隆的方法插入到穿梭载体pSES-HUS上,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-SES-HUS-CHD5siRNA重组质粒,在HEK293细胞中包装成重组腺病毒Adr-simCHD5,然后感染NIH3T3细胞,用RT-PCR和Western Blot方法检测其对CHD5mRNA和蛋白表达的干扰效果.结果：得到高滴度Adr-CHD5siRNA重组腺病毒,RT-PCR和Western Blot结果表明该重组腺病毒能有效地降低CHD5基因的表达.结论：成功构建Adr-CHD5siRNA重组腺病毒载体,并在NIH3T3细胞上实现CHD5基因表达抑制,为进一步研究CHD5基因功能奠定了基础.
- 染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5),RNA干扰,腺病毒载体

计量

文章访问数: 451
HTML全文浏览数: 150
PDF下载数: 0
施引文献: 0

小鼠CHD5基因siRNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

陈妮,左国伟,潘玥,赖国旗,杨根岭,向延秀,韩建红,黄云

重庆医科大学实验动物中心,重庆,400016,重庆医科大学医学检验系,重庆,400016,重庆医科大学实验动物中心,重庆400016/重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆400016,重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学实验室,重庆,400016,泸州医学院实验动物科,四川泸州,646000,泸州市畜牧局,四川泸州,646000

关键词:

染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5),RNA干扰,腺病毒载体

摘要: 目的：构建小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白5（CHD5）基因干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）重组腺病毒载体并在NIH3T3细胞中验证其干扰作用.方法：人工合成靶向CHD5的siRNA干扰序列,用分子克隆的方法插入到穿梭载体pSES-HUS上,并与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,得到pAdeasy-SES-HUS-CHD5siRNA重组质粒,在HEK293细胞中包装成重组腺病毒Adr-simCHD5,然后感染NIH3T3细胞,用RT-PCR和Western Blot方法检测其对CHD5mRNA和蛋白表达的干扰效果.结果：得到高滴度Adr-CHD5siRNA重组腺病毒,RT-PCR和Western Blot结果表明该重组腺病毒能有效地降低CHD5基因的表达.结论：成功构建Adr-CHD5siRNA重组腺病毒载体,并在NIH3T3细胞上实现CHD5基因表达抑制,为进一步研究CHD5基因功能奠定了基础.