Effects of Dendrobium nobile on the Laying Rate and Egg Quality of Chishui Silkie Hens in the Late Laying Period

供试金钗石斛购自贵州省遵义市赤水市金钗石斛产业开发有限公司，石斛碱质量分数为0.41%，石斛多糖质量分数为9.50%，纤维素质量分数为72.41%，将石斛烘干粉碎后采用逐级混匀的方式添加到蛋鸡的日粮中。

养殖试验在贵州省遵义市贵州竹乡鸡养殖有限公司进行。选择270只健康的、体质量相近的600日龄赤水乌骨鸡母鸡，随机分为3组，每组6个重复，每个重复15只。对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ组、Ⅱ组分别在基础日粮中加入700、1 400 mg/kg金钗石斛粉。金钗石斛用量参考《中华人民共和国药典》2020版成人每天常用量6~12 g(干品)，结合鸡的体质量与采食量计算得出。

试验鸡群采用3层阶梯蛋鸡笼进行单笼饲养，每个笼子长50 cm、宽52 cm、高37 cm，每一排笼子从左到右、从上到下依次进行编号，顶层第1笼为1-1，中间层第1笼为2-1，底层第1笼为3-1。编号1-1至1-30、2-1至2-30、3-1至3-30为对照组；编号1-31至1-60、2-31至2-60、3-31至3-60为试验Ⅰ组；编号1-61至1-90、2-61至2-90、3-31至3-90为试验Ⅱ组。试验期间鸡群自由采食和饮水，饲养环境温度为23 ℃，湿度为60%~65%，每天光照16 h，预饲期15 d，正饲期90 d。饲料配方及营养水平见表 1。

预饲期完成后，每日记录每组各个重复的采食量、产蛋数和产蛋质量。试验完成后计算每组的平均日采食量、日产蛋量和料蛋比。

试验90 d时，每个重复随机收取3枚鸡蛋，每组18枚鸡蛋，共54枚，24 h内测定蛋品质。利用蛋品质测定仪(EA-01，以色列Orka)测定每枚鸡蛋的蛋质量、蛋黄色泽、蛋白高度和哈氏单位；利用蛋壳强度测定仪(EFA-01，以色列Orka)测定蛋壳强度，单位为N/m²；利用电子天平[DL-A2000，华志(福建)电子科技有限公司]称蛋黄质量，精确到0.01 g；利用数字游标卡尺(DL90150，宁波得力工具有限公司)测量3个蛋壳区(顶端、赤道和基部)的蛋壳厚度、蛋的横向直径(D_横向)和纵向直径(D_纵向)并取平均值，精确到0.01 mm，计算蛋形指数(I_蛋形)：

试验90 d时，每组分别随机收集18枚鸡蛋，将鸡蛋打碎，用烧杯收集蛋清和蛋黄，用玻璃棒把蛋清和蛋黄搅拌均匀，制成混合样品倒入培养皿中，用冷冻干燥机(E313042，白乐科技有限公司)进行干燥；干燥后的样品用粉碎机(800Y，武汉海纳电器有限公司)粉碎后过40目筛，收集样品并做标记，分别按照《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》(GB/T 5009.124—2016)和《食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定》(GB 5009.168—2016) 的方法测定全蛋中氨基酸和脂肪酸的含量。每组样品测3个重复，结果取平均值。

采用Excel 2010整理原始数据；采用SPSS 22.0对试验数据进行单因素方差分析，结果以x±s表示。

由表 2可知，与对照组相比，试验Ⅰ组的产蛋率显著高于对照组(p＜0.05)，试验Ⅱ组也提高了产蛋率但没有达到显著水平，3个组的平均日采食量、平均蛋质量和料蛋比差异无统计学意义(p＞0.05)。

由表 3可知，试验Ⅰ组蛋的哈氏单位和蛋黄颜色显著高于对照组和试验Ⅱ组(p＜0.05)；试验Ⅰ组蛋白高度显著高于试验Ⅱ组(p＜0.05)；平均蛋质量呈现随金钗石斛添加量升高而降低的趋势，蛋黄质量和蛋壳厚度随金钗石斛添加量升高而升高，但均未达到显著水平；蛋壳强度、蛋形指数各组之间差异无统计学意义(p＞0.05)。

由表 4可知，试验Ⅰ、Ⅱ组赤水乌骨鸡的蛋中丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、总氨基酸(TAA)、非必需氨基酸(NEAA)的含量均显著高于对照组(p＜0.05)。试验Ⅱ组天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、必需氨基酸(EAA)的含量显著高于对照组(p＜0.05)。蛋中苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸等各组之间差异无统计学意义(p＞0.05)。

由表 5可知，试验Ⅰ组赤水乌骨鸡蛋中的棕榈酸、亚油酸、二十二烷酸、总饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸均显著高于对照组和试验Ⅱ组(p＜0.05)。试验Ⅱ组油酸显著高于对照组和试验Ⅰ组(p＜0.05)。对照组γ-亚麻酸、二十四酸显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组；对照组、试验Ⅰ组顺-11，14-二十二碳二烯酸、二十二碳五烯酸显著高于试验Ⅱ组(p＜0.05)。各处理组中n-3多不饱和脂肪酸、n-6多不饱和脂肪酸的含量差异无统计学意义(p＞0.05)。

产蛋后期的高产母鸡一般都会出现产蛋性能、蛋品质变差的问题，其主要原因是长期产蛋积累的活性氧(ROS)引起的氧化应激，导致卵巢老化^[6]，因此缓解氧化应激对产蛋后期母鸡卵巢的损害有助于延长蛋鸡的使用年限。目前在日粮中添加发酵黄芪、人参茎叶药渣、艾叶粉等中药及其副产物能显著提高鸡的产蛋率和蛋品质^[7-9]，但在日粮中添加石斛对鸡的生产性能和蛋品质的影响研究还未见报道。金钗石斛中的主要活性成分具有抗氧化、抗衰老等功能，其中金钗石斛多糖具有较显著的抗细胞衰老的作用^[10]，金钗石斛生物碱可使小鼠p53蛋白所介导的DNA甲基转移酶表达降低从而实现抗衰老作用^[11]。金钗石斛可以促进卵泡发育，对卵巢细胞具有保护作用^[12]。金钗石斛中的石斛多糖还可以增加小鼠卵泡细胞的数量，缓解卵巢早衰^[13-14]。本试验在日粮中添加700 mg/kg的金钗石斛粉可使赤水乌骨鸡的产蛋率提高4.59%，而1 400 mg/kg的金钗石斛粉虽然对赤水乌骨鸡的产蛋率有一定程度的提高，但未达到显著水平，由此推测赤水乌骨鸡产蛋率的提高可能与石斛的抗氧化和促进卵泡发育有关，但其作用机制还需进一步验证，700 mg/kg的金钗石斛粉能更好地改善赤水乌骨鸡的产蛋率。

蛋黄颜色及哈氏单位反映了蛋的新鲜程度，也是评价鸡蛋蛋品质的重要指标，蛋质量和蛋白高度是决定哈氏单位的直接因素，与畜禽营养物质的消化吸收密切相关^[15]。林标声等^[16]的研究结果表明，蛋质量的降低会使哈氏单位升高。在本试验中试验组添加金钗石斛后产蛋率均高于对照组，但采食量并没有显著差异，这可能是平均蛋质量降低的原因，而且试验Ⅰ组蛋白高度高于对照组，蛋质量的降低和蛋白高度的升高直接影响了哈氏单位。另有研究表明在蛋鸡日粮中添加抗氧化剂能显著提高鸡蛋的蛋黄颜色^[17]，本试验在日粮中添加700 mg/kg的金钗石斛能显著提高蛋黄颜色，可能与石斛的抗氧化性能有关。

鸡蛋的氨基酸比例与人体蛋白的结构和组成极为相似，容易被吸收利用，其消化吸收率高达98%，营养价值高，是人类摄取优质蛋白的重要来源^[18]。氨基酸生物合成前体的重要来源为糖酵解的中间产物以及三羧酸(TCA)循环的中间体^[19]。多糖在TCA循环过程中产生的丙酮酸、α-酮戊二酸、草酰乙酸，在转氨酶的催化作用下，能与游离的氨基生成相应的丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸^[20-22]。本试验所用金钗石斛的多糖质量分数为9.50%，试验Ⅰ组、Ⅱ组赤水乌骨鸡的蛋中丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、亮氨酸、总氨基酸(TAA)、非必需氨基酸(NEAA)、必需氨基酸(EAA)的含量提高可能与此有关。谷氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、丙氨酸属于呈味氨基酸，有利于食物呈现出特殊的鲜味^[23]。根据FAO/WHO提供的参考数据，蛋白质中EAA/TAA高于40%，EAA/NEAA高于60%的食物是较为理想的蛋白来源^[24]。本试验EAA/TAA和EAA/NEAA的比值均高于FAO/WHO的模式标准，说明金钗石斛对蛋中的氨基酸组成及含量有积极影响。

鸡蛋中的脂肪酸对人体有非常重要的意义，在营养价值方面饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)对机体的生长发育、疾病的缓解和免疫调节等方面均有改善作用^[25]。棕榈酸属于饱和脂肪酸，对婴儿的健康非常重要，有研究表明棕榈酸摄入不足可能对婴儿身体发育有害，例如容易诱发炎症、减少组织修复和再生^[26]。亚油酸属于多不饱和脂肪酸，对人体健康有着重要的意义和价值，是人体不能合成的必需脂肪酸之一，也是γ-亚麻酸和花生四烯酸的合成前体物质，有助于降低人体血浆胆固醇和改变体内胆固醇的分布，进而预防心血管疾病的发生^[27]。油酸有降血压和胆固醇的功效，同时也能降低心血管疾病的发病率，食用富含油酸的食品有助于改善健康状况^[28]。蛋中脂肪酸根据来源不同可分为内源性和外源性，内源性脂肪酸是指机体利用糖和蛋白合成的脂肪酸，外源性脂肪酸主要从日粮中吸收获取^[29]。内源性脂肪酸和外源性脂肪酸都需要转化为极低密度脂蛋白经血液运输到卵巢，在卵母细胞的内吞作用下沉积^[30]。脂肪酸从游离状态至沉积到蛋里的过程中需要载脂蛋白、脂肪酸转运蛋白2(FATP2)等的参与^[31]。有研究表明石斛能增加肝脏中FATP2的表达水平，从而加快脂肪酸的代谢^[32]。本试验在赤水乌骨鸡日粮中添加金钗石斛，使鸡蛋中的多种脂肪酸含量显著高于对照组，可能与金钗石斛对脂肪酸合成与转运相关蛋白的调控有关。

在日粮中添加700 mg/kg的金钗石斛能显著提高赤水乌骨鸡的产蛋率、蛋品质、鸡蛋中的多种鲜味氨基酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的水平，结果为金钗石斛作为饲料添加剂提高鸡的产蛋性能提供了理论依据。