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猪圆环病毒Ⅱ型可引起断奶仔猪发生多系统衰竭、成年猪综合性肾病、成年猪坏死性肺炎、成年猪不孕不育、孕猪流产等多种疾病，对肉猪的繁殖饲养具有重大威胁[1-2]. 1974年，德国科学家首先发现了猪圆环病毒，经过大量的临床试验研究，不具有致病力的猪圆环病毒被称为Ⅰ型，具有致病力的猪圆环病毒被称为Ⅱ型[3-4]. 21世纪初，我国首次发现并从国内猪群中分离出了具有致病力的猪圆环病毒Ⅱ型.在短短的10多年时间里，我国已经成为猪圆环病毒Ⅱ型感染最为严重的国家之一[5].猪圆环病毒Ⅱ型不仅引发疾病的种类多，而且对两种性别、幼年到成年的猪均可感染，一旦感染发病率超过50%、致死率超过3%、个别区域的致死率最大达到40%[6].猪圆环病毒Ⅱ型的病毒粒子没有囊膜，粒子主要由核酸和衣壳蛋白构成，从形状上看呈现20面体的对称结构，直径大小为17个nm[7].从遗传特征上看，猪圆环病毒Ⅱ型的基因组是单股环状双向的DNA，其基因序列全长，或为1 767 bp或为1 768 bp[8].在世界各地发现的猪圆环病毒Ⅱ型，具有较为保守的遗传特性.从一些研究来看，猪圆环病毒Ⅱ型的核苷酸同源性介于93%~100%之间，这表明猪圆环病毒Ⅱ型核苷酸地域分布差异不明显[9-10].从组织亲嗜性来看，猪圆环病毒Ⅱ型的亲嗜性非常广泛，对于猪的淋巴结组织、心脏组织、肝脏组织、脾脏组织、肺脏组织、脑组织、胸腺组织、胰腺组织、肠管组织、膀胱组织都具有亲嗜性[11-12].感染后的猪体内，淋巴结组织和脾脏组织中的病毒含量最高.猪圆环病毒Ⅱ型一般通过消化道、呼吸道进入猪体内对淋巴细胞进行感染，这种感染会导致淋巴细胞的调亡进而损伤淋巴组织，白细胞随之减少、血清抗体无法有效中和病毒，最后病毒向猪体其他组织蔓延，从而导致临床症状的发生[13-15].因为个体差异、疫苗接种等因素，感染猪圆环病毒Ⅱ型的猪也可能不出现临床症状.感染猪圆环病毒Ⅱ型，一旦出现临床症状，猪的致死率将超过70%[16].本文将以猪圆环病毒Ⅱ型吉林株为研究对象，分析其对小鼠的致病力，并以此对猪圆环病毒Ⅱ型吉林株的致病力进行判断.
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本次对于致病力的研究，主要针对笔者所在地区进行.因此，选取了吉林省4个县市的猪圆环病毒Ⅱ型病毒株，分别是磐石病毒株(PS0901)、蛟河病毒株(JH0901)、桦甸病毒株(HD0901)、舒兰病毒株(SL0901).在试验中还采用了猪圆环病毒Ⅱ型阳性血清和阴性血清，实验小鼠100只.所用的主要仪器包括荧光定量分析仪、超净工作台等.
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选取5周大小的小鼠100只，分为5组，每组20只.其中，第1组小鼠注入浓度为2%的DMEM细胞培养液，第2组小鼠注入PS0901株细胞毒，第3组小鼠注入JH0901株细胞毒，第4组小鼠注入HD0901株细胞毒，第5组小鼠注入SL0901株细胞毒.病毒液的注入，采用腹腔注射方式为主，时间间隔周期为7 d，每隔7 d注射1次.第1组小鼠是其余4组小鼠的参照对象.
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在小鼠第一次感染猪圆环病毒Ⅱ型吉林株后，对下一个注射周期内处死的小鼠，执行解剖处理并观察小鼠体内各个脏器的病变情况，包括肝脏组织、肺脏组织、脾脏组织、肾脏组织、肠道组织膜内淋巴结.对这些脏器组织采用TaqMan荧光执行定量的PCR检测，对检测结果进一步采用Eviews进行方差比较.
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取出已经感染的小鼠各脏器组织进行石蜡切片制作，进一步经过染色处理便于各个脏器病理变化的观察.病理切片的制作过程为：①病理组织取材，组织大小设定为0.5 cm3；②病理组织固定，将病理组织投入到浓度为10%的甲醛溶液中固定处理24 h；③脱水处理，将固定好的病理组织脱水处理，分别采用浓度为30%，50%，70%，80%，95%的酒精处理；④透明化处理，采用二甲苯溶液对病理组织进行透明脱水处理；⑤浸蜡处理，将透明处理的病理组织分别放在一杯软石蜡和量杯硬石蜡中；⑥包埋处理，将浸蜡处理后的病理组织放置在包埋框中；⑦切片处理，将包埋后的病理组织蜡块运用切片机切成5~7 μm之间的切片；⑧贴片处理，让切片自然伸展后放在载玻片上烘干；⑨染色封装处理，将贴片处理的病理组织，采用二甲苯、各种浓度酒精、染色液执行脱蜡进水染色处理，进而盖上盖玻片完成封装，以备镜检.
2.1. 攻毒试验
2.2. 组织亲嗜性检测
2.3. 小鼠病理组织切片制作与观察
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检测猪圆环病毒Ⅱ型吉林株的组织亲嗜性，分别考察小鼠肺脏、脾脏、肾脏3个部分的情况.
猪圆环病毒Ⅱ型吉林株对于肺脏组织亲嗜性的结果，如图 1所示.
图 1中分别显示了病毒感染后7 d，14 d，21 d，28 d，5组注入肺脏组织的病毒含量变化.从图 1中可以看出，SL0901组猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度一直比其他3组高，并且在第21 d达到最大值，说明猪圆环病毒Ⅱ型吉林株SL0901对于小鼠肺部组织的亲嗜性最强.
猪圆环病毒Ⅱ型吉林株对于脾脏组织亲嗜性的结果，如图 2所示.
图 2中分别显示了病毒感染后7 d，14 d，21 d，28 d，5组注入脾脏组织的病毒含量变化.从图 2中可以看出，第4组HD0901、第5组SL0901猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度都呈现出先升后降的趋势，随后又有一定程度升高.第2组PS0901猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度先升后趋于平稳，第3组JH0901猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度呈稳步上升的趋势.
猪圆环病毒Ⅱ型吉林株对于肾脏组织亲嗜性的结果，如图 3所示.
图 3中分别显示了病毒感染后7 d，14 d，21 d，28 d，5组注入肾脏组织的病毒含量变化.从图 3中可以看出，第2组PS0901、第4组HD0901、第5组SL0901猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度变化趋势接近，都在21 d最低，第3组JH0901猪圆环病毒Ⅱ型的核酸浓度则恰好相反，在第21 d达到最高.
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分别对小鼠的脾脏和肾脏进行了H.E.染色观察.
小鼠脾脏组织的5组切片结果，如图 4所示.
从图 4中可以看出，猪圆环病毒Ⅱ型吉林株对于小鼠脾脏组织的感染，大小及结构分布都表现得不均匀，并且出现了和小鼠脾脏小体融合的情况.其中，第2组PS0901、第3组JH0901出现的融合最为严重.
小鼠肾脏组织的5组切片结果，如图 5所示.
从图 5中可以看出，猪圆环病毒Ⅱ型吉林株对于小鼠肾脏组织感染，都造成了不同程度的细胞增生.第2组PS0901、第3组JH0901的情况最为严重，导致了较为明显的肾脏病变，包括肾小球囊腔出现萎缩、毛细血管出现破裂.
3.1. 组织亲嗜性
3.2. 病理组织切片结果
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从组织亲嗜性来看，猪圆环病毒Ⅱ型的亲嗜性非常广泛，对于猪的多种组织具有亲嗜性，从而导致猪的某些脏器组织衰竭，诱发严重的疾病并导致高致死率.但是，猪圆环病毒Ⅱ型在不同地区的变种，以及侵入个体的不同会表现出一些差异.
本文重点考察了猪圆环病毒Ⅱ型吉林株的致病力影响，分别对比了磐石病毒株(PS0901)、蛟河病毒株(JH0901)、桦甸病毒株(HD0901)、舒兰病毒株(SL0901)的不同情况.通过一系列组织亲嗜性实验发现：
1) 猪圆环病毒Ⅱ型吉林株SL0901对于小鼠肺部组织的亲嗜性最强；
2) 猪圆环病毒Ⅱ型吉林株HD0901在第14 d时对于小鼠脾脏组织的亲嗜性最强；
3) 猪圆环病毒Ⅱ型吉林株SL0901在第7 d时对于小鼠肾脏组织的亲嗜性最强；
而从组织切片结果可以看出，猪圆环病毒Ⅱ型吉林株PS0901，JH0901一旦对脏器组织构成感染，其病变情况则更为严重，会出现肾小球囊腔萎缩、毛细血管破裂等病情.