抗猪IgG单克隆抗体的研制

吴胜昔,蔡家利,胡仁建

西南大学学报（自然科学版）

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抗猪IgG单克隆抗体的研制

吴胜昔,蔡家利,胡仁建. 抗猪IgG单克隆抗体的研制[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(12).

引用本文:

吴胜昔,蔡家利,胡仁建. 抗猪IgG单克隆抗体的研制[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2007, 29(12).

Preparation of Monoclonal Antibodies Against Porcine IgG[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(12).

Citation:

Preparation of Monoclonal Antibodies Against Porcine IgG[J]. Journal of Southwest University Natural Science Edition, 2007, 29(12).

抗猪IgG单克隆抗体的研制

吴胜昔,蔡家利,胡仁建

重庆工学院,生物工程学院,重庆,400050

Preparation of Monoclonal Antibodies Against Porcine IgG

摘要: 采用饱和硫酸铵盐析、离子交换柱层析技术从猪血清中提纯IgG. 经SDS-PAGE电泳鉴定, 纯化的IgG达到电泳纯. 以此纯化的IgG, 采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠, 取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合, 融合率为90.3，. 建立间接ELISA, 用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体. 初检阳性率为13.9，. 经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株, 命名为6B4、 4B8. ELISA证实所获得的单抗是特异性针对IgG, 6B4、 4B8经反复冻存, 复苏及多次传代, 仍能分泌高效价抗体, 分泌抗体均属IgG1、κ型. 本研究所获得的单克隆抗体将对检测猪抗体水平及IgG提纯发挥重要作用.
- 层析技术,猪IgG,单克隆抗体

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抗猪IgG单克隆抗体的研制

吴胜昔,蔡家利,胡仁建

重庆工学院,生物工程学院,重庆,400050

关键词:

层析技术,猪IgG,单克隆抗体

摘要: 采用饱和硫酸铵盐析、离子交换柱层析技术从猪血清中提纯IgG. 经SDS-PAGE电泳鉴定, 纯化的IgG达到电泳纯. 以此纯化的IgG, 采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠, 取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合, 融合率为90.3，. 建立间接ELISA, 用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体. 初检阳性率为13.9，. 经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株, 命名为6B4、 4B8. ELISA证实所获得的单抗是特异性针对IgG, 6B4、 4B8经反复冻存, 复苏及多次传代, 仍能分泌高效价抗体, 分泌抗体均属IgG1、κ型. 本研究所获得的单克隆抗体将对检测猪抗体水平及IgG提纯发挥重要作用.