PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数

严铮辉,潘夕春,强玮,廖志华

西南大学学报（自然科学版）

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PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数

严铮辉,潘夕春,强玮,廖志华. PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2014, 36(2): 021-027.

引用本文:

严铮辉,潘夕春,强玮,廖志华. PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数[J]. 西南大学学报（自然科学版）, 2014, 36(2): 021-027.

Citation:

PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数

严铮辉,潘夕春,强玮,廖志华

1. 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715;2. 西南大学生命科学学院,重庆400715

摘要: 三分三是我国特有的托品烷类生物碱药源植物.采用基于发根的外源基因表达技术,农杆菌介导遗传转化三分三,获得转烟草PMT 和莨菪H6H 基因的发根、基因组PCR鉴定转基因发根、液体摇床培养后,HPLC检测发根中莨菪碱和东莨菪碱质量分数.结果发现:在三分三转基因发根中,能够同时检测到1177bp的莨菪H6H 基因片段和451bp的烟草PMT 基因片段,而非转基因发根没有检测到这2个基因,表明外源PMT 和H6H 这2个基因整合进了三分三基因组.转基因发根系T11中东莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近6倍,比自然根高出近25倍;转基因发根系T25中莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近8倍,比自然根高出近75倍;转基因T25中东莨菪碱和莨菪碱总量最高,比非转基因发根系高出近7倍,比自然根高出近44倍.
- 三分三 /
- 托品烷类生物碱 /
- 代谢工程

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PMT 和H6H 双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数

严铮辉,潘夕春,强玮,廖志华

1. 三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715;2. 西南大学生命科学学院,重庆400715

收稿日期: 2013-03-19

关键词:

摘要: 三分三是我国特有的托品烷类生物碱药源植物.采用基于发根的外源基因表达技术,农杆菌介导遗传转化三分三,获得转烟草PMT 和莨菪H6H 基因的发根、基因组PCR鉴定转基因发根、液体摇床培养后,HPLC检测发根中莨菪碱和东莨菪碱质量分数.结果发现:在三分三转基因发根中,能够同时检测到1177bp的莨菪H6H 基因片段和451bp的烟草PMT 基因片段,而非转基因发根没有检测到这2个基因,表明外源PMT 和H6H 这2个基因整合进了三分三基因组.转基因发根系T11中东莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近6倍,比自然根高出近25倍;转基因发根系T25中莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近8倍,比自然根高出近75倍;转基因T25中东莨菪碱和莨菪碱总量最高,比非转基因发根系高出近7倍,比自然根高出近44倍.