Effects of Shading on Chlorophyll Fluorescence and Physiological and Biochemical Characteristics of Parashorea cathayensis Wang Hsie

试验材料来源为望天树实生苗.

试验地点在云南省西双版纳州景洪市云南省热带作物科学研究所荫棚试验区(22°05′N，100°80′E)中进行. 试验点海拔约553 m，属北热带西南季风气候，长夏无冬. 年平均气温为18.6~21.9 ℃之间，年蒸发量1 310.6 mm，≥10 ℃的年积温8 100.4 ℃，日温差大，年降雨量1 161.8 mm，平均相对湿度85%，年平均日照1 800~2 300 h，太阳辐射总量504~571.2 kJ/年.

试验于2017年4月选择大小相对一致的望天树实生苗移栽到高35 cm和直径30 cm的盆内，每盆1株，盆中土壤为混合基质(砖红壤、有机肥和泥炭土比例为60∶1∶2). 试验设置4种光照处理，即T0：对照CK无遮荫处理，全自然光照，透光率100%；其他3个处理通过增加遮荫网层数设置光强梯度，T1为1层遮荫网，透光率75%；T2为2层遮荫网，透光率50%；T3为3层遮荫网，透光率25%，共4个水平. 采用随机分组法，每个光处理下幼苗5株. 整个生长过程中统一进行水肥管理，随时清除杂草及防治病虫害.

从2018年1月至12月，每月均用数显游标卡尺测定植株基径，用卷尺测量植株株高. 株高和基径的相对生长速率(RGR)^[8]计算公式为

式中：d₁和d₂分别为生长前期和后期幼苗的基径(cm)，h₁和h₂则为对应时间幼苗的株高(cm)，t₁和t₂分别为观测时间(月).

2018年5月选取不同处理望天树幼苗的稳定叶片，每处理选取15片，用Li-3000型叶面积仪测定叶片面积(TLA)；将其叶片放入80 ℃烘箱中烘干至恒质量，48 h后取出用电子分析天平称干质量(DMA). 计算比叶面积(SLA)和比叶质量(LMA)，公式为

2018年5月，每个处理分别选取3株生长稳定中部枝条的倒数第2~3片功能叶，采后立即带回实验室进行各项生理生化指标测定：叶绿素(Chl)质量分数测定采用直接浸提法^[9]，丙二醛(MDA)质量分数测定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法，可溶性蛋白质(SP)质量分数测定采用考马斯亮蓝染色法，可溶性糖(SS)和蔗糖(Suc)质量分数测定采用蒽酮比色法^[10].

2018年5月上午8：30-11：30，在天气晴朗和气温湿度适中的条件下，用德国Walz公司PAM-2500型便携式荧光仪进行慢相叶绿素荧光参数的测定. 饱和脉冲光强为4 500 μmol/(m²·s)，光化光强为800 μmol/(m²·s)，测定前叶夹进行20 min遮光处理，以保证叶片完全进入暗适应状态. 测定指标：暗适应后最小荧光(F0)，暗适应后最大荧光(Fm)，可变荧光(Fv)=Fm-F0，PSII最大光化学效率=Fv/Fm，半饱和光强(IK)以及电子传递速率ETR；其中，ETR=Y×PAR×0.5×0.84(Y为全部光合量子产量，PAR为入射到样品的光合有效辐射强度).

所有统计分析用Excell和SPSS 17.0完成，所有图形用Excell绘制.

图 1中可看出，在不同遮荫处理下，望天树幼苗4个处理间的变化是随遮荫度增加先稍上升再下降，相对生长速率大小依次为T1＞T2＞T0＞T3. 其中：T1相对生长速率最大，为0.33；T3最小，为0.20. 处理T1和T2间的差异有统计学意义，T0和T2间差异无统计学意义. 因此可以看出，望天树幼苗透光率75%处理相对生长速率最大，最适合生长.

图 2显示，望天树幼苗叶片比叶面积在T3处理下最大(217.31 cm²/g)，其次是T1和T2，T0最小(161.37 cm²/g). 望天树幼苗叶片比叶面积呈现随着遮荫程度增加而上升的趋势，表明其在通过增加比叶面积来提高光的截获量.

图 3显示，望天树幼苗叶片比叶质量以T0最大，为6.21 g/m²，其次是T1和T2，T3最小，为4.61 g/m². 叶片比叶质量的变化趋势表现为随着遮荫程度增加而下降，表明遮荫处理影响了望天树叶片的光合效率和光合产物积累.

表 1显示，望天树幼苗叶片叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、可溶性糖和蔗糖质量分数随着遮荫度的增大而表现出先升后降. 叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素的质量分数在T2处理下最高，其次是T1，T0，T3. 可溶性糖和蔗糖质量分数在T1处理下最高，其次是T0，T2和T3，表明一定程度的遮荫会导致望天树幼苗的叶绿素、可溶性糖和蔗糖的质量分数增加. 可溶性蛋白和丙二醛质量分数均是在T0处理下显著高于T1，T2和T3，表明强光会导致望天树幼苗产生更多的可溶性蛋白和丙二醛.

由表 2可知，望天树幼苗叶片初始荧光(F0)随遮荫程度的增加而先增加后下降，T1最高，其次T0，T2和T3，说明在T1和T0处理下望天树幼苗F0较大，能促进望天树幼苗的光合作用. 最大荧光(Fm)、可变荧光(Fv)和PSII最大光化学效率Fv/Fm随遮荫程度增加呈上升的趋势，由大到小依次为T3，T2，T1，T0. 望天树幼苗电子传递速率(ETR)和半饱和光强(IK)随遮荫程度的增加先降后升，T0高于T1，T2和T3，表示望天树幼苗IK在T0处理耐受光最大，其次是T1处理；在T1和T0处理下望天树幼苗ETR较高，光合电子传递速率较大，T2处理光合电子传递速率最低.

光是植物生长发育过程中不可或缺的环境因子，通过光敏色素途径来调节植物生长、发育及形态，使其更好地适应环境. 从本试验结果看出，透光率75%下望天树幼苗相对生长速率最大，地径和苗高生长均较快，说明望天树苗期在此光环境下生长最好，这与张巧巧等研究结果一致^[11]. 植物比叶质量反映叶片的厚薄和同化产物的质量分数^[12]，本试验结果显示，自然光100%、透光率75%和50%下望天树叶片都能捕获到满足生长所需的光照，光合效率高，积累的光合产物多. 比叶面积能反映植物对不同生境的适应特征，与叶片净光合速率呈正相关^[13]；比叶面积越大，植物能捕获的光能越多，能够获得更丰富的养分资源和适应湿润的环境. 此次试验结果为望天树幼苗遮荫后比叶面积增高，与闫兴富等研究结果一致^[14]，透光率75%，50%和25%有利于望天树净光合速率的提高和捕获较多光能，在遮荫环境下生长速度快.

叶绿素在光合作用中直接参与光能的吸收与转换^[15]，其叶绿素总质量分数能反映其光合作用能力的大小^[16]. 试验表明，透光率75%和50%能促进望天树幼苗中叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素质量分数的增加，这与方阔等研究结果一致^[17]. 这是因为叶片在此光环境中提高了对光能的吸收与转换能力，增加了光合作用和干物质的积累^[18]. 自然光下，过剩的光能被叶片吸收与转换使叶绿素漂白，降低了叶绿素总量. 可溶性糖、蔗糖与可溶性蛋白是重要的初生代谢产物，是植物体内重要的能源物质和适应蛋白，受外界环境影响较大^[19]. 光照的过强和不足时，植物的光合作用受到抑制，光合产物减少，造成可溶性糖和蔗糖质量分数的减少^[20]. 透光率75%下有利于望天树幼苗光合速率的提高，光合产物的增加，可溶性糖质量分数相应增加. 丙二醛是植物膜脂过氧化反应的产物之一，其质量分数的高低能表明植物膜脂过氧化程度；望天树幼苗叶片中丙二醛质量分数在透光率为75%和50%均较低，表明此环境有利于望天树幼苗的生长；自然光下望天树幼苗丙二醛最大，说明受干旱胁迫影响丙二醛质量分数升高^[21].

PSII最大光化学效率Fv/Fm反映了植物的潜在最大光能转换效率，在健康生理状态下，绝大多数植物的Fv/Fm在0.75~0.85之间^[22]，当Fv/Fm下降时，代表植物受到了胁迫. 本研究中望天树幼苗Fv/Fm值随遮荫程度的增加呈上升的趋势，表明望天树幼苗遮荫后没有受到光胁迫. 电子传递速率(ETR)反映的是实际光强下的表观电子传递效率和潜在的最大光合能力^[23]，ETR越高，其耐光抑制能力就越强^[24]. 望天树幼苗自然光100%和透光率75%耐光抑制能力强. 半饱和光强(IK)反映植物对光的耐受能力，自然光100%和透光率75%耐受能力大.

望天树幼苗具有一定耐荫性，适当的遮荫处理有利于望天树幼苗的生长，本研究认为望天树人工育苗时需要适宜的遮荫处理，最佳透光率在75%~50%之间.